八角莲肉桂醇脱氢酶基因的克隆和表达分析

鬼臼毒素是八角莲的重要药效成分。利用同源克隆和RACE的方法,从八角莲的根中克隆了鬼臼毒素生物合成途径肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)基因,长1 098 bp,编码由365个残基组成的氨基酸序列。八角莲CAD蛋白不含有质体定位的信号序列,与毛白杨(Populus tomentosa)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)等物种中CAD蛋白的一致性为67.25%;系统发育分析表明,它与拟南芥的At CAD7、At CAD8和AtCAD6蛋白亲缘关系较近,聚成一个簇。组织表达分析结果表明,八角莲CAD基因在根和茎中有表达,而叶片中表达不明显。本研究获得的CAD基因,为后续进行详细的功能解析,并进一步应用于鬼臼毒素的遗传调控,奠定了基础。     

藏药桃儿七的快繁体系及其鬼臼毒素含量分析

[目的]建立藏药桃儿七的组培-移栽体系,并比较野生桃儿七与组培桃儿七的根茎中鬼臼毒素的含量差异。[方法]以藏药桃儿七种子为外植体诱导愈伤组织,将组培苗炼苗移栽,并利用高效液相色谱技术(HPLC)测定野生品桃儿七与组培品桃儿七的根茎中鬼臼毒素的含量。[结果]桃儿七带胚种段在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L GA3培养基上愈伤诱导率最好,达33.33%;组培苗在蛭石基质中存活较好,成活率可达80%以上;西藏野生品桃儿七根茎中鬼臼毒素含量为1.01%,组培品中含量为0.087%。[结论]通过组织培养可在不破坏野生资源的前提下生产鬼臼毒素,该研究为桃儿七引种栽培提供了试验指导。