尖膀胱螺对毒死蜱毒性的生物化学响应

以尖膀胱螺作为试验动物,研究毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统、乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶的影响.通过预试验获得尖膀胱螺72 h LC50为243 μg/L,推算的安全浓度为16 μg/L,正式试验以16和121.5 μg/L浓度组分别暴露尖膀胱螺96 h.在第24、48和96 h分别取材,测定尖膀胱螺体内超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、一氧化氮合酶(NOS)的活性和丙二醛(MDA)含量变化情况.结果显示,在推算的安全浓度(16 μg/L)暴露后,尖膀胱螺体内MDA含量和NOS活性在各时间段变化均不明显,而SOD和AChE活性在96 h被抑制;在高浓度组(121.5 μg/L),尖膀胱螺SOD呈现先上升后下降后又有所回升的趋势,MDA水平持续上升,NOS水平被显著性诱导,AChE活性则被显著性抑制,且在48 h时抑制作用最强.试验结果表明毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统和神经中枢均产生一定的影响,提示尖膀胱螺可作为毒死蜱毒理学试验模型动物,同时MDA和AChE可作为毒死蜱毒性的生物标记物.     

鲢即刻早期基因c-fos和c-jun的克隆及其序列分析

原癌基因c-fos和c-jun 属于即刻早期基因,在神经元兴奋传导和中枢神经系统活动过程中起着重要作用。通过ＲＡＣＥ技术首次克隆了鲢（Ｈｙｐｏｐｈｔｈａｌｍｉｃｈｔｈｙｓｍｏｌｉｔｒｉｘ）肝脏c-fos和c-jun基因,通过生物信息学方法预测分析了该基因的结构和功能。结果表明,鲢肝脏c-foscDNA 全长为1719bp,开放阅读框1059bp,编码３５２个氨基酸;ｃ-jun cDNA全长1931bp,其中开放阅读框９２７ｂｐ,编码３０８个氨基酸;二级结构预测可知,c-fos 包含２５．８５％的α-螺旋,１２．７８％的延伸链,１．４２％的β 折叠和５９．９４％的无规则卷曲;ｃ-ｊｕｎ包含３２．１４％的α-螺旋,５．５２％的延伸链,１．６２％的β-折叠和６０.７１％的无规则卷曲。分析其功能结构位点,发现在１０８～１７２aa 和２２７～２９１aa处有１个典型的亮氨酸拉链结构。通过构建氨基酸系统发育树,鲢与草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）c-fos同源性高达９７％,与草鱼c-jun同源性高达９５％,而与哺乳动物同源性较低。     

毒死蜱对尖膀胱螺的急性毒性试验

选取尖膀胱螺(Physa acuta)作为试验材料,研究了毒死蜱对尖膀胱螺的急性毒性作用.结果表明,随着毒死蜱浓度的升高和处理时间的延长,各浓度组尖膀胱螺的平均死亡率均升高,呈明显的剂量效应和时间效应.毒死蜱对尖膀胱螺的24、48、72、96 h的LC50分别为0.577、0.308、0.243、0.160 mg/L,安全浓度为0.016 mg/L.试验结果显示,尖膀胱螺对毒死蜱非常敏感,含微量毒死蜱的水体都会对尖膀胱螺的生存产生危害.因此,尖膀胱螺可作为水环境毒理学研究的实验动物模型.     

3种常用杀虫剂对尖膀胱螺的急性毒性试验

采用上-下法和改进寇氏法分别研究了高效氯氟氰菊酯（lambda-cyhalothrin）、吡虫啉（imidacloprid）和阿维菌素（avermectin）对尖膀胱螺（Physa acuta）的急性毒性,用上-下法测得高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、阿维菌素对尖膀胱螺的48hLC50分别为2.581、10.030、0.104mg/L。用改进寇氏法获得高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、阿维菌素对尖膀胱螺的24hLC50分别为4.447、12.676、0.110mg/L;48hLC50分别为2.252、9.789、0.096mg/L;72hLC50分别为2.113、8.818、0.056mg/L;96hLC50分别为1.643、7.959、0.034mg/L;安全浓度分别为0.164、0.796、0.003mg/L。结果表明,用上-下法与改进寇氏法所获得的LC50基本接近。尖膀胱螺对3种杀虫剂都非常敏感,含微量杀虫剂的水体均会对其生存产生危害。     

3种常用杀虫剂对尖膀胱螺的急性毒性试验

采用上-下法和改进寇氏法分别研究了高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、吡虫啉(imidacloprid)和阿维菌素(avermectin)对尖膀胱螺(Physa acuta)的急性毒性,用上-下法测得高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、阿维菌素对尖膀胱螺的48 h LC50分别为2.581、10.030、0.104 mg/L.用改进寇氏法获得高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、阿维菌素对尖膀胱螺的24 h LC5o分别为4.447、12.676、0.110mg/L;48 h LC50分别为2.252、9.789、0.096 mg/L;72 h LC50分别为2.113、8.818、0.056 mg/L;96 h LC50分别为1.643、7.959、0.034 mg/L;安全浓度分别为0.164、0.796、0.003 mg/L.结果表明,用上-下法与改进寇氏法所获得的LC50基本接近.尖膀胱螺对3种杀虫剂都非常敏感,含微量杀虫剂的水体均会对其生存产生危害.     

咪唑类离子液体处理对草鱼CYP3A和PXR基因表达的影响

细胞色素Ｐ４５０是一类含有亚铁血红素的超家族单加氧酶,参与许多外源物质（包括药物、环境化合物等）和内源性物质（如激素）的代谢转化。ＣＹＰ３Ａ是Ｉ相解毒酶系Ｐ４５０家族中的重要成员,在肝脏对外源毒物解毒和内源激素的代谢过程中发挥重要作用。为探讨草鱼（Ctenopharygodon idellus）肝脏ＣＹＰ３Ａ在溴化１-辛基３-甲基咪唑离子液体（［Ｃ８ｍｉｍ］Br）的解毒过程作用以及鱼体对［Ｃ８ｍｉｍ］Br的解毒是否通过ＰＸＲ-ＣＹＰ３Ａ转录调控途径作用,通过预试验获取［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼的急性毒性效应,选取２２ｍｇ／Ｌ（１／１０ＬＣ５０）和１０９ｍｇ／Ｌ（１／２ＬＣ５０）浓度组［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼染毒２４ｈ,荧光定量ＰＣＲ检测ＣＹＰ３Ａ和ＰＸＲ的表达情况。结果表明,草鱼肝脏ＣＹＰ３Ａ水平与对照组相比极显著上升（Ｐ＜００１）,ＰＸＲ基因表达量与对照组相比也极显著升高（Ｐ＜０．０１）,ＣＹＰ３Ａ与ＰＸＲ基因表达水平呈现出一定的相关性;推测在草鱼体内ＰＸＲ可能就是［Ｃ８ｍｉｍ］Ｂｒ作用于ＣＹＰ３Ａ的受体。