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为获得紫茎泽兰处理鸡柔嫩艾美耳球虫后差异基因,将0.5%紫茎泽兰提取液作用于鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化过程,采用抑制消减杂交技术(SSH)筛选处理后卵囊的差异表达基因,通过GO和COG功能预测分析,并采用实时荧光定量PCR验证差异表达的基因。结果显示,采用SSH成功构建了紫茎泽兰处理前后鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的cDNA消减文库,获得86条ESTs序列,经拼接和聚类后得到31条独立基因(Unigenes),其中有23个基因有功能注释,8个基因没有功能注释,另外有4个基因没有同源性匹配。为进一步验证文库的特异性,从中随机选取3个差异表达基因,运用实时荧光定量PCR技术验证表面抗原13、3-羟酰辅酶A脱氢酶和细胞色素P450基因在紫茎泽兰处理前后的表达差异,结果显示,3个基因在经紫茎泽兰处理的鸡球虫孢子化卵囊中的表达量明显低于未处理组,说明紫茎泽兰对柔嫩艾美耳球虫卵囊具有一定的活性抑制作用。本试验获取了紫茎泽兰作用柔嫩艾美耳球虫卵囊的主要调控基因,为将紫茎泽兰研发成环境杀虫剂奠定了良好的理论基础,也可为球虫致弱疫苗或基因缺失疫苗的靶标筛选研究提供参考。 相似文献
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中草药的免疫增强作用 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来应用免疫学理论和方法研究中草药的免疫增强作用受到广泛重视,多数补益中草药具有免疫增强作用,其主要活性物质如多糖、甙类、生物碱、有机酸、挥发性成分等对动物机体免疫系统的刺激作用而呈现较为典型的非特异性免疫和特异性免疫的促进作用,部分补益药还显示双向调节作用;大量研究表明,中草药的防治疾病作用是通过调动动物体内非特异性抗菌抗病毒积极因素如细胞吞噬、抗体、细胞因子、自然杀伤细胞、溶菌素、杀菌素(酶)等来增强免疫功能而实现的;此外中草药因毒副作用小、宏观调节动物体整体机能等优点,在免疫促进方面显示了独特的优越性. 相似文献
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猪附红细胞体病的诊断与防治 总被引:2,自引:0,他引:2
附红细胞体病是由附红细胞体感染机体引起的一种人畜共患传染病。附红细胞体是寄生于红细胞表面、血浆及骨髓的一类微生物。附红细胞体病通常在猪发生,猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在猪红细胞表面或游离于血浆中引起的一种急性、热性传染病,在许多国家和地区均有发生和流行。该病临床上以发热、贫血、溶血性黄疸、呼吸困难、皮肤发红等为特征,在全国各地均有报道发生,近几年在国内部分省区都呈爆发流行,给养猪业造成严重的经济损失。1流行情况本病最早于1928年Schilling和Dinger分别在啮齿类动物中发现球状附红体,但过去因其对摘除… 相似文献
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为了分离猫源弓形虫,本试验从云南洱源、怒江两地区捕捉18只野猫,取其心脏、肝脏、肺脏、脑组织用盐酸—胃蛋白酶溶液消化处理后,腹腔接种小白鼠,将分离到的弓形虫虫株至少传3代,用特异PCR方法对所分离的虫株进行鉴定。结果表明,从18只野猫的样品中分离出3株弓形虫虫株,用特异性引物对3株虫株进行PCR鉴定,均得到弓形虫的特异性目的条带,测序结果表明所扩增出的DNA片段确为弓形虫核糖体B1基因部分序列。同源性比对分析结果显示分离株与T.gondii B1的同源性为100.0%。将动物组织用盐酸—胃蛋白酶溶液消化处理后腹腔接种小白鼠是一种分离弓形虫虫株较理想的方法,对弓形虫B1基因进行特异性扩增,可以快速地鉴定弓形虫虫株。 相似文献
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非洲马瘟病毒VP7基因的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白,以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础,笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白。在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列,人工合成VP7基因,将VP7基因片段克隆插入pBAD/Thio-TOPO表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌TOP10。经测序鉴定,筛选获得VP7基因正向插入、有正确读码框的阳性克隆,经L-Arabinose诱导表达VP7融合蛋白抗原。SDS-PAGE分析表明以终浓度为0.2%的L-阿拉伯糖进行诱导,4h后表达可达到高峰,融合蛋白质量约54.72 kDa。Western blotting检测和间接ELISA表明诱导表达的融合蛋白能与非洲马瘟病毒VP7单克隆抗体发生特异性反应,说明蛋白有特异的免疫学活性。 相似文献
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