鸭大肠杆菌病流行病学与病原特性研究

对浙江等地鸭大肠杆菌病流行病学进行调查，并研究其发病特点，分离鉴定出致病性大肠杆菌26株；已对其中20株菌株进行血清型鉴定，主要为078，占70%（14/20），其次是O1，占15%（3/20）；人工感染试验表明，80%（8/10）菌株毒力强，皮下、肌肉、足蹼3种途径均易复制该病；病理组织学检查肝、肺、脾等，表现急性炎症，出血等病变；药敏试验表明，不同菌株对药物敏感性差异较大，除对鸭菌消、卡那霉素等高敏外，对多数常用抗菌药已耐药，最后就该病的防治提出了对策。     

家兔传染性鼻炎病原菌的分离及其致病作用的研究

鼻炎是家兔常见多发的呼吸道传染病．据对某大型种兔场６次３１２８１头次普查，有鼻炎症状兔７３７９只，占普查数的２３．６％，占总发病数５０％以上。以鼻拭子采取鼻腔分泌物样品１１０份，分离出的波氏杆菌，巴氏杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌，经动物发病试验证明，可以单独引起鼻炎和肺脏病理变化，而往往是几种细菌同时引起鼻炎综合症。球菌，包括金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌，有很高的分离率，但人工发病却未出现症状和病理变化。溶血性链球菌和脑膜脓毒黄杆菌人工发病也未能引起病理过程。其他还分离到副嗜血杆菌，鼠棒状杆菌、蜡样芽孢杆菌等。     

野生苏铁上发现曲纹紫灰蝶危害

苏铁植物(Cycads)早在2亿多年前的中生代就与恐龙并存于地球,是现存最古老的种子植物类群之一,它们对于研究种子植物的起源与演化、种子植物的区系与古气候、古地理的变迁等都具有重要意义;它们同时也是一类观赏价值很高的园艺植物,有很好的开发利用前景.正因为如此,苏铁植物遭受的人为破坏也就十分严重,大部分种类现已濒临灭绝.     

鸭疫里氏杆菌形态特征的电镜观察

自鸭传染性浆膜炎的病死鸭中分离鉴定的鸭疫里氏杆菌(RA)Ⅰ、Ⅱ型两个菌株，用负染法和超薄切片法制备样品，于透射电镜下进行观察。结果观察到约占1／3的RA具有特殊的形态结构：在细菌的顶端或侧面有1～2个与菌体相连的芽状赘生物，有的也能从菌体上脱落下来。它在超薄切片中的大小约为菌体的1／3～1／5，能观察到其内部也具有类似菌体内部的结构。且具有类似菌体的“细胞壁”，类似于核体部分的结构位于“细胞壁”的一侧。而用相同的方法制作的鸭大肠杆菌(E．cozi)对照样品，却见不到这种特殊的形态结构。说明这种形态特征可能是RA特有的。     

不同保鲜膜对草莓果实贮藏品质的影响

以草莓"红颜"为试材,以PVC(聚氯乙烯)膜为对照,研究了PE(聚乙烯)膜、PHM(多层PE系)膜、纳米银膜、PVDC(聚偏二氯乙烯)膜等5种保鲜处理在(4.0±0.6)℃贮藏条件下对草莓果实失重率、硬度和可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量及感官品质的影响。结果表明:相较于PVC保鲜膜,PVDC膜与PHM膜能够较好的保持草莓果实的贮藏品质。其中PVDC膜包装可以有效地减少果实水分散失,保持草莓的硬度以及果实可溶性固形物含量;PHM膜包装可以较好的保持草莓果实可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量,维持果实的营养成分。     

不同贮藏温度对甘薯品质的影响

为明确贮藏温度对甘薯品质的影响,以甘薯品种‘心香’为试验材料,研究了贮藏温度（8,12,15,20,22℃）对甘薯食味品质、可溶性总糖、可溶性固形物、失重率、腐烂率、发霉率和发芽率的影响。结果表明：8℃贮藏可以显著提高甘薯贮藏前期食味品质及可溶性总糖含量,但甘薯易受冷害,贮藏后期腐烂率较高;12℃贮藏可以显著降低甘薯失重率和腐烂率,且贮藏84 d内无发芽、发霉现象;15℃甘薯发霉率、20℃发芽率显著高于其他处理,22℃易使薯块失水萎蔫,均不利于甘薯的保鲜。综合来看,短期贮藏（28 d内）时,8℃贮藏可以较快提高甘薯食味品质;长期贮藏时（84 d内）,12℃贮藏效果最好。     

快速检测兔支气管败血波氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立及应用

利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16S rRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测.结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA.用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符.该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路.     

鸭肝炎病毒浙江分离株全基因组测序及其VP1基因的序列分析

利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术及RACE方法扩增得到鸭肝炎病毒(DHV)浙江分离株Z10的全基因(5',3'末端序列用RACE法扩增)及4株DHV分离株的VP1基因.结果表明,分离株Z10的全基因片段长7689 bp,有1个大的开放读码框(ORF),ORF位于626～7326位核苷酸,编码2249个氨基酸.Z10分离株全基因序列与GenBank登录的6株具有代表性的DHV核苷酸序列比对,同源性94.5%～98.4%;所测得的DHV分离株的VP1基因的序列与目前GenBank上发表的具有代表性的DHv-Ⅰ VP1基因进行比对分析,结果4株Ⅰ型DHV的VP1基因cDNA长度均为714 bp,编码238个氨基酸.4株DHV-Ⅰ之间VP1基因的核苷酸序列同源性为93%～99.7%,氨基酸序列同源性为95.0%～100%;与参考毒株VP1基因的核苷酸序列同源性为92.2%～100%,氨基酸序列同源性为95.0%～100%;表明各分离毒株的亲缘关系较近,属于同一基因群.     

鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病多重PCR诊断方法的建立

参考GenBank中鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,应用PrimerPremier5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对已分离并保存的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌进行PCR扩增,分别扩增出与试验设计相符的670、408bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为鸭疫里默氏菌和大肠杆菌OmpA基因序列。该方法对鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的检测下限分别为4×104CFU/mL和3×104CFU/mL。表明所建立的PCR方法具有特异、快速和敏感的特点,可用于诊断鸭疫里默氏菌、大肠杆菌以及两者的混合感染。     

兔巴氏杆菌和波氏杆菌多重PCR检测方法的建立

参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。