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1.
【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104(WT)为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系(ZmIBH1-1-OE);通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理(20% PEG6000),进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs);结合DAP-seq(DNA affinity purification sequencing)分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV(integrative genomics viewer)分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T3代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T4代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性)均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology(GO)功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。 相似文献
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正马山县是国家级贫困重点县,现有贫困村75个,贫困人口23.8万,贫困发生率45.7%,具有贫困发生率高、贫困发生程度深、贫困原因复杂等特征。马山县县委、县人民政府为实现如期脱贫、成功摘帽,高度重视脱贫攻坚工作,不仅抓输血式扶贫,而且主推造血式扶贫,出台系列产业扶贫项目,大力发展产业项目,实施产业扶贫,尤其是积极谋划和认真实施了一批农业种植、养殖项目,成立了一些新型农业经营组织,建立一批种养殖示范基地,吸纳一些贫困户就地就近就业,起到了良好的示范效应,增收脱贫效果明显。由于脱贫攻坚任务重、时间紧,在实施产业项目的过程中,存在项目建设不规范、种养技术水平低、经营管理能力差和脱贫效果不理想等问题,为此马山县委、县政府特邀广西人才服务办公室、广西老科协专家一行进行现场把脉和技术指导,现将产业扶贫情况探析如下。 相似文献
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“找好代理商,种田不瞎忙”如今正成为成武县农民的一种新时尚。今年以来,该县已有1000多农户与100名销售代理商签订了合同。 随着市场经济的发展,一些农民由于受信息不灵、销售渠道不畅等因素的影响,备尝增产不 相似文献
7.
在考虑健康的时候,不能够忽略精神与体质的关系。人类物质文明的发达,使生活越将受到精神的支配,为情绪所左右。 身体健康,并不等于一切都顺利。体质不佳,不仅是形体上的疾病,往往是由精神原因造成的。近年来,有很多人在形体上并没有什么特殊的疾病或异常,只是由于精神不正常而导致了体制的恶化。例如,每个人多少都会有过这样的经验,即有了令人心烦的事以后便会感到食欲不振。这就是肠胃功能受精神影响的缘故。经研究证明,当人的心情严重不安时,食欲一定不好,整个胃的功能不活跃,胃液分泌减少。此乃心情不安使大脑中食欲中枢的兴奋性下降所致。 反之,也有的人肩负重任,拼命工作,精神处于高度的紧张状态, 相似文献
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目前我国多数农机产品售价仅为越制产品的一半,因此,越南消费者倾向购买中国的农业机械。越南每年需要5万~6万台小型发动机,约4万辆拖拉机、15万台水泵,以及数量较多的打谷机、收割机、烘干机等,我国农机产品在越南 相似文献
10.
杂交水稻制种过程中,在父母本花期相遇的情况下,花时相遇的机率大小,直接影响制种产量.影响花时相遇的因素,除不育系的遗传性外与温湿度有密切的相关性,在一定范围内温度越高,相对湿度越大,花时相遇的机率越高,制种产量越高,反之,则制种产量越低. 相似文献