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[目的]构建青天葵器官大小调控基因——Erb3结合蛋白(Erb3-binding protein,EBP1)编码基因的原核表达载体,以期为通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定基础。[方法]将引入酶切位点的NfEBP1基因的PCR产物及表达载体pET-28、pET-16b分别进行双酶切,之后连接相应的酶切产物,热击转化到E.coli Top10细胞,通过菌落PCR、测序和酶切筛选阳性重组子。将确认的阳性重组子质粒转化至E.coli BL21表达宿主菌,并对其进行双酶切验证。[结果]构建了重组表达质粒pET-28-NfEBP1-1188和pET-16-NfEBP1-1188,其转化E.coli BL21表达宿主细胞后,分别获得含有2个载体的工程菌。[结论]该研究成功构建了青天葵EBP1基因的原核表达载体,为后续通过原核表达体系鉴定该基因的功能奠定了基础。 相似文献
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为了建立丁公藤扦插繁殖和组织培养方法,设计正交实验,考察插枝长度、插枝浸润和浇灌的生根液浓度对丁公藤扦插存活及出芽的影响,考察不同种类和浓度的植物激素以及来源于不同叶位的外植体对丁公藤愈伤组织诱导的影响。根据正交试验结果,丁公藤扦插繁殖的最优条件组合为:扦插前浸润生根液浓度为15%、插枝长度为10~12 cm、扦插后浇灌生根液浓度为0.1%,扦插后第43 d的最高存活率和出芽率分别达到87.5%和50%;诱导愈伤组织的最优培养基为MS+0.25 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/L Na2S2O3,室内培养的扦插苗第2位叶为诱导愈伤组织的最适外植体,诱导率最高达94.44%。建立了丁公藤扦插繁殖和愈伤组织诱导方法,为通过人工快繁缓解丁公藤资源紧缺提供了基础。 相似文献
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表皮生长因子受体3结合蛋白(ErbB3 binding protein, EBP1)是植物器官大小生长的关键调控因子。本研究应用RACE-PCR技术从濒危药用植物青天葵(Nevilia fordii (Hance) Schltr.)中克隆获得EBP1编码基因并命名为NfEBP1。该基因全长为1188 bp (Genbank登记号JN854245),编码395个氨基酸。生物信息学分析表明,NfEBP1蛋白分子量为43.4 kD,等电点为6.12,整体表现为亲水性。NfEBP1不含信号肽、叶绿体转运肽或线粒体靶向肽,整体位于细胞膜外;其二级结构由21个α-螺旋、21个延伸链、18个β-转角和28个随意卷曲构成。 NfEBP1含有PA2G4细胞增殖功能域,与其他植物EBP1有着高度的同源性,均归属APP_MetAP超级家族。 NfEBP1在青天葵不同组织均有表达,相对表达量以叶片最高,球茎次之,叶柄则最低。本研究成功克隆青天葵EBP1基因并分析其在青天葵不同组织的表达水平,为下一步利用该基因促进青天葵器官生长研究提供了基础数据。 相似文献
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在文献(2)中,我们曾讨论了修正梯形加速度曲线凸轮轮廓应用于封罐机、裹包机等食品加工、包装机械上能获得良好的效果。由于摆线曲线是组接修正梯形加速度曲线的基础。因此,本文就摆线凸轮机构参数的确定作进一步分析和讨论。 相似文献
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陈蔚文 《上海水产大学学报》1992,(Z1)
在文献[2]中,我们曾讨论了修正梯形加速度曲线凸轮轮廓应用于封罐机、裹包机等食品加工、包装机械上能获得良好的效果.由于摆线曲线是组接修正梯形加速度曲线的基础.因此,本文就摆线凸轮机构参数的确定作进一步分析和讨论。 相似文献
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陈蔚文 《上海水产大学学报》1999,8(4):383-386
众所周知,渔业机械不同于汽车、家电等产品,它品种少、批量小。它的许多冷冲压零件或注塑零件亟需一种新型制模材料,使模具制造具有工艺简单、周期短、成本低的显著特点。本文介绍一种近几年在国外得到迅速发展,在国内得到高度关注的新型制模材料,希望引起我国渔业机械行业重视及推广使用。l金属超塑性概述与特点金属受外力作用,在完整性不破坏的条件下,产生永久变形的性能称为塑性。通常用伸长率来表示。在拉伸试验时,伸长率a用下式计算:式中,4——伸长率;Lo——试样原始标距长;L——拉断后试样的长度。一般黑色金属在室温下… 相似文献
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活销在绞纲机的排绳装置中作为往复运动的主要传力构件,其圆弧工作面与螺杆螺槽侧壁的接触为线接触.复杂的受力条件,使它极易磨损.为了改善其工作条件,提高它的使用寿命,目前,虽然已有了不少有效的方法,但是,润滑是减少磨损常用的基本手段,所以,从弹流润滑理论方面考虑,提出一些必要措施,仍不失为有效途径之一.弹流润滑(缩写 EHL 或 EHD),就是指弹性流体动力润滑.它是研究在高副接触体中弹性体间的流体动力润滑问题的.近二十多年来,该理论有 相似文献
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以鸡血藤及其4种常见混伪品为试材,采用植物基因组DNA提取试剂盒提取鸡血藤样品总DNA,并采用matK基因通用引物扩增和测序,从GenBank获取鸡血藤4种混伪品的matK基因序列,采用DNAMAN、MEGA等生物软件比对分析序列差异,计算遗传距离并构建聚类树,研究matK基因对鸡血藤及其混伪品的鉴别效果。结果表明:获得的鸡血藤及其混伪品matK序列长度为690bp,平均GC含量为31.1%,共发现236个差异位点,占总碱基数的34.2%。8个鸡血藤样品matK序列在41bp处存在A-G碱基差异。鸡血藤与混伪品之间的种间变异大于鸡血藤样品内的变异。基于matK基因序列建立的聚类树能够明显地鉴别鸡血藤及其混伪品。matK基因可作为鉴别鸡血藤及其混伪品的标准DNA序列。 相似文献