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应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析草菇同核和异核菌丝蛋白质组 总被引:1,自引:0,他引:1
首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所有鉴定蛋白进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、层次聚类(hierarchical clustering)分析和GO(gene ontology)注释,并进行生物信息学分析。结果共获得2335个不同肽段,鉴定到1039个蛋白,其中1030个蛋白具有定量信息。在同核菌丝中显著上调蛋白83个,下调蛋白97个,表明iTRAQ标记技术结合二维液相色谱串联质谱可有效地分离和鉴定草菇菌丝蛋白质组。该研究结果为更深入全面地研究草菇菌丝蛋白质组学奠定基础。 相似文献
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通过对色谱条件和样品前处理方法进行优化,建立固相萃取—亲水作用色谱法测定香菇(Lentinula edodes)中硫杂脯氨酸的检测方法。优化后的色谱条件为:Inertsil HILIC 亲水作用色谱柱(4.6×250 mm,5μm)对样品进行分离测定,流动相采用乙腈-0.1%磷酸水(85∶15,v/v)等度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长193 nm,柱温30℃。前处理方法为:香菇样品采用甲醇-水(70∶30,v/v)提取,MAX阴离子固相萃取小柱进行净化处理,甲醇-1.0%甲酸(90∶10,v/v)作为洗脱剂对目标物进行洗脱。检测结果表明,硫杂脯氨酸在2~100μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,加标回收率为96.3%~101.7%,相对标准偏差在1.3%~4.8%之间,检出限为0.76μg/g,定量限为2.31μg/g。该方法回收率高、简单、快速、无需衍生化,适用于香菇子实体硫杂脯氨酸的定量检测分析。 相似文献
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刚采摘的银耳在烘干前通常需要经过清水浸泡,往往造成银耳营养成分及重量的流失。本研究通过设置不同浸泡时间,检测银耳的干物质以及营养物质的流失情况,以期获得最适的浸泡时间。结果显示:银耳干物质在浸泡1h后流失较为严重;多糖在浸泡1.5h后流失较为严重;粗蛋白在浸泡2h后流失较为严重;在浸泡50min的时候发现总三萜流失;粗脂肪在浸泡1.5h时后流失就较为严重。因此,在银耳烘干前的浸泡工艺中,建议将浸泡时间控制在1.0~1.5h,能较大程度地减少银耳浸泡过程中的营养流失,且保持鲜艳的颜色及舒展的朵型,从而为在浸泡过程中减少营养物质损失提供一定的理论依据。 相似文献
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以长裙竹荪抑菌物质的提取量和抑菌效果为指标,研究乙醇提取的长裙竹荪抑菌活性物质的最佳工艺。基于单因素试验结果,设计二次通用旋转组合试验,工艺的最优参数由回归方程分析确定。结果表明,长裙竹荪乙醇提取物对金黄色葡萄球菌Staphylococus aureus、苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis、大肠杆菌Escherichia coli、巨大芽孢杆菌Bacillus magaterium、鸡瘟沙门氏菌Salmonella pullorum、肠炎沙门氏菌Salmonella enteritidis、枯草芽孢杆菌Bacillus subrilis均有抑菌效果,其中对肠炎沙门氏菌的抑菌效果最好。各因子对竹荪抑菌物提取效果的影响作用为温度时间液固比,优化后的提取条件为提取时间1.5h、提取温度72℃、液固比25∶1。研究结果为竹荪抑菌物质工业化开发为食品天然防腐剂提供参考。 相似文献
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4种有害重金属在毛木耳栽培过程中的积累规律 总被引:1,自引:0,他引:1
通过添加试验研究了4种有害重金属铅、镉、汞、砷在毛木耳栽培过程中的迁移规律以及子实体对重金属的富集情况.结果表明:不同重金属在毛木耳的栽培过程中均会发生迁移现象,但迁移的量差异较大.在试验含量范围内,毛木耳对栽培料中汞的富集能力较强,富集系数为0.817~2.346;对铅、镉、砷的富集系数分别为0.051~0.256、0.027~0.607、0.215~0.457.根据栽培料和子实体中的铅、镉、汞、砷含量建立了4个吸收方程,分别为:y=1.926lnx-1.896,y=0.527 188/[1+EXP(1.340 6-0.327 281x)],y=10.172 1/[1+EXP(1.895 1-0.488 843x)],y=3.732 2/[1+EXP(3.106 8-0.426 570x)].根据回归方程可推算,当栽培料中铅、镉、砷的含量分别高于4.498、12.993、2.9 mg·kg~(-1)时,毛木耳子实体的重金属含量超过国家标准;而栽培料中的汞不得检出,才能保证子实体的汞含量不会超过国家标准. 相似文献
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从大孔树脂类型、洗脱剂与上样量等方面确定灰树花中抑糖基化反应化合物的初分离条件,并选取抑糖基活性最高的组分进行薄层层析分析和硅胶柱分离纯化,最后利用高效液相色谱法和傅里叶红外光谱分析化合物。结果表明:采用D101大孔树脂,25 g树脂最佳上样量为2 g,20%乙醇洗脱组分C_3的抑糖基化活性最高。用氯仿∶甲醇(v/v 1∶9)为洗脱液对C_3进行硅胶柱层析纯化,共分离出5个组分C_35~C_39,其中C_38和C_39具有比较强的抑糖基化活性,合并C_38和C_39,再次用氯仿∶甲醇=(v/v 2∶8)为洗脱液进行硅胶柱层析纯化,共分离出5个组分G_1~G_5,薄层层析和HPLC分析分别显示G_3为单一斑点和单一峰型,说明G_3是一种单体化合物,根据红外光谱结果初步推断该化合物为酚类物质。 相似文献