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【目的】制备麦长管蚜单克隆抗体,为进一步研究麦蚜的捕食性天敌种类奠定基础。【方法】应用杂交瘤技术制备单克隆抗体;双抗夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)鉴定抗体类型及亚类;间接ELISA测定抗体特异性;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot印迹分析确定抗体结合蛋白。【结果】制备出2株高度特异性的麦长管蚜单克隆抗体,分别命名为EGA-1E8和EGA-4H11,分别属于IgM亚类和IgG2b亚类。麦长管蚜抗原由多种多肽组成,其中单克隆抗体EGA-4H11与麦长管蚜抗原54.2 kD的多肽结合。特异性试验表明,这2种抗体不与麦田中其他种类的昆虫和蜘蛛发生交叉反应。【结论】成功地制备了麦长管蚜单克隆抗体,为进一步研究麦蚜的捕食性天敌种类奠定了可靠的基础。 相似文献
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褐飞虱单克隆抗体的制备及其初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
应用杂交瘤技术,制备了4株褐飞虱的单克隆抗体,分别命名为3B2、3B11、3H3和4B8,其只与褐飞虱所有虫态发生反应,不与稻田其它主要昆虫和蜘蛛发生交叉反应,具有高度的特异性,应用4B8初步检测浙江大学华家池校区农场稻田蜘蛛对褐飞虱的阳性反应率,其中拟环纹豹蛛,拟水狼蛛和纵条蝇狮的阳性反应率最高,粽管巢蛛,黑肩绿盲蝽次之,狡蛛较低,而八斑鞘腹蛛,跳蛛,肖蛸和食虫瘤胸蛛未检测到阳性反应,拟环纹豹蛛对4B8的阳性反应率与褐飞虱和拟环纹豹蛛种群密度均极显著相关(r=0.612**,r=0.632**)。 相似文献
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用过碘酸钠氧化法交联核糖基异戊烯基嘌呤和卵清蛋白,并免疫Bal.b/c小鼠.鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选获得抗核糖基异戊烯基嘌呤单克隆抗体.将活化的Sepharose6B与单克隆抗体交联制成免疫亲和色谱柱.发酵液经免疫亲和柱纯化后用高效液相色谱检测,其纯度极高.比较了不同洗脱条件对免疫亲和柱纯化的影响,认为利用免疫亲和柱纯化发酵液具有内源性杂质干扰少的优点,是生物样品预处理的一种有效方法. 相似文献
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以含中华蜜蜂王浆抗菌肽Acc-royalisin基因的该蜂头部cDNA文库质粒为模板,用PCR方法扩增出其前体片段,并克隆入表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌BL21中与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合进行表达,得到大小为36ku,占细胞总蛋白16.3%,与GST多克隆抗体有免疫反应的表达产物;用割胶回收获得的目的蛋白注射新西兰大白兔,采集血清制备多克隆抗体,该抗体与纯化的GST-Acc-royalisin融合蛋白经ELISA反应显示出较高效价,经Westernblot印迹分析获得特异性条带.这为进一步利用免疫方法检测王浆的防腐性能和Acc-royalisin生物制品质量,以及蜜蜂抗病性奠定了基础. 相似文献
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cecropins是最早在天蚕中发现的抗菌肽,故被称为天蚕素(cecropin),由31~39个氨基酸残基组成,分子量约为4ku,具有广谱抗菌作用。目前已报道的cecropins有30多种,其中cecropin-P1是Lee等首先从猪小肠中分离得到的(Lee et al.,1989)。cecropin-P1含有31个氨基酸残基,分子量为3339u,不含半胱氨酸(Cys),不能形成分子内二硫键,有强碱性的N端和强疏水性的C端,C端酰胺化,酰胺化的C端对其广谱抗菌作用极为重要。 相似文献
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单克隆抗体夹心ELISA检测蚕豆萎蔫病毒研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用 2 株特异性单抗,建立了检测蚕豆萎蔫病毒(BBWV)的灵敏度高、特异性好的单抗夹心ELISA 方法⒚经测定,McAb 最适包被浓度为04 μg/m L,HRPMcAb 最佳工作浓度为1∶2 000,该方法最小检出浓度为016 μg/m L,与几种常见的病毒无交叉反应⒚对杭州地区的 140 多个样本进行了检测,发现蚕豆、豌豆中BBW V 的阳性率达 80% ⒚ 相似文献
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钩端螺旋体七日热血清型(56610)培养物,经甲醛灭活后免疫BAL B/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合获得6株阳性杂交瘤,分别定名为1A9、1B8、1F9、2D10、2E4、3E8,其中1A9、1F9、2D10、2E4为特异性抗56610杂交瘤。抑制试验结果表明,多抗血清能够有效地抑制这些特异性单抗,这些特异性单抗被鉴定为IgG1亚类。 相似文献
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