借助于色谱图判断色谱仪中出现的故障

最近,作者在色谱工作中遇到了一些实际问题,通过分析、查找、判断,最后解决了这些问题。现向同行作以简单介绍,以使大家在今后的工作中遇到同样或类似的情况,能够用来参考、借鉴。     

家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右     

土著微生物对尾矿中重金属的淋滤研究

生物淋滤对尾矿的重金属污染处理的效果已经得到了广泛的认可.在对酸性尾矿中的土著氧化硫硫杆菌以及氧化亚铁硫杆菌进行分离以及加富培养的基础上，分别运用单一菌种以及混合菌种对尾矿样本进行淋滤处理.通过12 d的淋滤实验，实验室结果表明，分离出的氧化亚铁硫杆菌以及氧化硫硫杆菌等土著微生物具有较高的利用价值.同时实验表明，在采用适当菌种的前提下，尾矿中重金属的溶解率都得到了不同程度的提高：土著氧化亚铁硫杆菌对Zn的淋滤效果最好，达到了98.12%；对于Cu的淋滤，土著氧化亚铁硫杆菌与土著氧化硫硫杆菌的混合菌种的效果最好，达到88.75%.     

贵州火龙果生态栽培管理技术(二)

<正>(上接本刊2019年第2期"贵州省火龙果生态栽培管理技术(一)")4火龙果种苗繁育技术4.1扦插枝条准备选择优质、无病虫害的健壮植株,采集棱宽1.5厘米以上、棱厚0.2厘米以上的色深、健壮枝条。将枝条截成20～30厘米茎段,将基部的三棱削成斜面,并露出1厘米左右的木质部,刀口处用灭菌灵粉或高锰酸钾消毒,放阴凉通风处晾3～5天扦插。扦     

贵州低热河谷地区西番莲的优质高效栽培技术

西番莲作为贵州省"十三五"主推精品水果之一,在贵州省果树产业助力脱贫攻坚中扮演重要角色。其特有的芳香气息与酸甜口感使之成为水果市场新宠。从适用范围、环境要求、常见繁殖方式及后期管理、栽培要点、主要病虫害防治、采收时期等方面介绍了贵州低热河谷地区西番莲的高效栽培技术。     

夏训对优秀皮划艇运动员铁调素等铁营养状况以及IL-6的影响

目的：探讨夏训对优秀运动员铁调素等铁营养状况以及IL-6的影响。方法：广东省优秀皮划艇运动员26人(男15人，女11人)参加测试，调查夏训前和夏训后血红蛋白、铁调素、可溶性转铁蛋白受体、血清铁蛋白、可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白、血清铁、总铁结合力、转铁蛋白饱和度以及白介素6变化情况。结果：夏训后，男运动员组铁调素和可溶性转铁蛋白受体极显著上升(P<0.01)、血清铁蛋白极显著下降(P<0.01)，可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白显著上升(P<0.05)，总铁结合力显著下降(P<0.05)，白介素6极显著上升(P<0.01)。女运动员组血红蛋白显著降低(P<0.05)，铁调素和可溶性转铁蛋白受体极显著上升(P<0.01)，血清铁蛋白极显著下降(P<0.01)，可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白极显著上升(P<0.01)，白介素6极显著上升(P<0.01)。结论：夏训可引起运动员炎症因子升高、铁调素升高，导致功能铁不足；铁调素介导的铁代谢紊乱可能是运动性低血色素发生的重要原因。     

全球养猪业疾病形势日趋严峻

正对现代养猪业而言,疾病的暴发是常见的威胁,这需要严格的生物安全措施以及先进的科技手段。不仅在畜禽行业新闻中,在大众媒体中牲畜疾病问题的曝光率也越来越高。一些人畜共患疾病的曝光可能会引起民众恐慌,而另一些疾病对养猪户或地区经济也可能会造成灾难性影响。猪流行性腹泻在北美和欧洲的暴发都引起了生产者的恐慌。口蹄疫     

高职院校辅导员队伍现状及职业化建设方法研究

近些年来,我国高等职业院校发展迅猛,在很多方面取得了长足的发展。但我们还要看到,在一些方面还存在着这样那样的问题。高职院校辅导员是高职院校建设中的重要支撑力量,本文就高职院校辅导员队伍现状进行了简要的分析,并就其职业化建设方法给出了一定的思路。     

百香果‘紫香1号’成熟果实的氨基酸分析与营养评价

[目的]测定百香果‘紫香1号’的氨基酸含量,以评价其营养价值。[方法]用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测了百香果‘紫香1号’成熟果实的氨基酸含量,以FAO/WHO氨基酸参考模式为评价标准,对百香果‘紫香1号’果汁蛋白质营养价值进行了全面评价。[结果] 百香果‘紫香1号’已检测出的17种氨基酸中,以天冬氨酸(Asp)含量最高,占氨基酸总量(TAA)的16.96%;人体必需氨基酸(EAA)和儿童必需氨基酸(CE)占氨基酸总量的23.36%和13.67%;味觉氨基酸中的鲜味氨基酸(FLA)含量最高,占氨基酸总量的47.89%;药用氨基酸(MAA)含量也很丰富,占氨基酸总量的62.68%,以天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)含量为主;氨基酸比值系数分(SRC)为89.69,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸(Met+Cys);[结论]百香果‘紫香1号’含丰富的氨基酸,有较高的营养价值和保健作用。     

不同架式栽培对台农1号百香果果实品质 和产量的影响

[目的]探究不同架式栽培对台农1号百香果果实品质和产量的影响,为筛选适宜台农1号百香果的架式模式提供参考依据.[方法]采用酸碱滴定、2,6-二氯靛酚滴定和蒽酮比色等方法对7种不同架式下台农1号百香果的果实品质进行对比研究,分析果实单果重、纵径、横径、果形指数、果皮厚度、可食率、种子数、果皮明度值(L*)、红绿值(a*)和黄蓝值(b*)等外观指标,及可溶性总糖、可滴定酸、可溶性固形物、Vc、糖酸比和固酸比等内在生理指标,产量取高、中、低小区平均值,并对指标进行方差分析和主成分分析.[结果]不同架式栽培下台农1号百香果的单果重、果实纵径和横径、果形指数、可食率及果皮厚度均差异不显著(P>0.05);其中,果形指数在1.08~1.10,近圆形;Y形架栽培的果皮L*、a*和b*值较其他架式高,分别为30.36、17.65和5.89;V形架栽培的可食率最高,达47.03%,果皮最薄,为0.54 cm;A形架的种子数明显低于其他架式;双层架和篱壁架的产量显著高于其他架式栽培(P<0.05,下同),不同架式产量排序为双层架>篱壁架>T形架>V形架>Y形架>棚架>A形架.不同架式栽培的果实可溶性固形物、可溶性总糖、维生素C、糖酸比及固酸比等内在品质指标均表现出一定的差异性.其中,A形架的果实可滴定酸含量显著高于其他架式;Y形架果实糖酸比和可溶性总糖含量显著高于其他架式;棚架的固酸比和Vc含量显著高于其他架式;篱壁架的果实可溶性固形物含量显著高于其他架式.主成分分析将所检测的17个指标综合为5个特征根大于1的主成分,累计解释方差为94.965%,能代表原17个指标性状的绝大部分信息,不同架式因子得分排序为V形架>Y形架>篱壁架>A形架>双层架>T型架>棚架.[结论]台农1号百香果适应性强,篱壁架的栽培模式简单易操作.根据贵州省地形、环境条件、架材和生产成本,因地制宜种植台农1号,并配套篱壁架栽培技术的管理,对推动贵州百香果产业跨越式发展具有重要意义.