黄连对大肠杆菌R质粒消除作用的实验研究

目的：在世界范围内，Ｒ质粒在细菌间的传递，引起了多重耐药性菌株的增加，给临床上抗生素的使用造成了严重的困难。人们试图寻找有效的消除剂，把Ｒ质粒从宿主菌株中消除掉，使其重新恢复对抗生素的敏感性。中药黄连常用于治疗腹泻与细菌性痢疾。但对致婴幼儿腹泻的大肠杆菌的Ｒ质粒是否有消除作用？本课题以黄连为质粒消除剂，研究黄连对大肠杆菌Ｒ质粒的消除作用。方法：致婴儿腹泻的大肠杆菌为本室保存菌株，已知对四环素、链霉素、氨苄青霉素耐药，其耐药性均由质粒介导。黄连为多次蒸馏提取的水溶性粉剂，主要成分为小檗碱。由吉林省中医中药研究院药物研究室提供。首先将大肠杆菌接种ＬＢ培养基中，经活化后，分别加入含不同浓度黄连的培养基中，判定黄连的亚抑菌浓度。从亚抑菌浓度管中取５０ｕｌ菌液，分别划种于ＳＳ平板上，经培养后，挑取单个菌落，以影印培养法，依次转接于含ＴＣ（２０ｕｇ／ｍｌ），ＳＭ（４０ｕｇ／ｍｌ）或ＡＰ（２０ｕｇ／ｍｌ）的药物平板上，３７℃培养２４～４８ｈ。消除子的筛选和鉴定：选择在含抗素的选择平板上不生长，而在不含抗生素的普通平板上生长的菌落，即为Ｒ质粒消除子。再经快速质粒抽提，琼脂糖凝胶电泳，以检测质粒带的消失情况。结果：黄连（１．     

临床微生物检验实验课的教学体会

微生物检验是医学检验专业学生的专业课程之一.我们围绕微生物检验的教学要求,结合临床微生物检验的工作特点,探索更好的微生物检验的实验教学方法,让学生更好地掌握基本理论和基本技能,获得了较好的教学效果.     

正常人鼻腔表皮葡萄球菌的带菌调查及药敏检测

表皮葡萄球菌是人体正常菌群菌之一 ,为条件致病菌。为了解正常人鼻腔的带菌状况及其药敏性状况 ,我们对我校的学生作了调查 ,现将结果报道如下。1　资料与方法1.1　调查对象共调查 2 0 2人均为本校 99年级入学新生 ,其中男 135人 ,女 6 7人。1.2　方法用棉拭子采取标本 ,高盐肉汤增菌 ,高盐甘露醇琼脂平板分离。菌珠行血浆凝固酶 (试管法 )、葡萄糖发酵、甘露醇发酵试验 ,按 COWAN’S手册鉴定。药敏用纸片法测定 (由杭州微生物试剂厂提供 ) ,计有 :环丙氟哌酸 (CIP)、氯霉素 (CHL)、复方新诺明 (SXT)、氯洁霉素 (CL I)、头孢氨苄 (…     

黄连对去污染小白鼠体内大肠埃希菌E.102株R质粒消除作用研究

目的：为了解黄连在动物体内有无消除Ｒ质粒的作用，探讨临床应用的可能性，本课题以多重耐药性的大肠埃希菌Ｅ．１０２株为靶细菌，建立一种以去污染的小白鼠为模型的Ｒ质粒体内消除实验方法。方法：首先用四环素，红霉素和利福平对实验用小鼠进行肠道细菌脱污染，建立去污染小白鼠动物模型，然后将靶细菌Ｅ．１０２株菌液经口感染，并随机分组，试验组小鼠每日经灌胃法给黄连１．２ｍｇ，对照组不给黄连。在给药后２４、４８、７２ｈ将小鼠处死，解剖取其盲肠内容物，以ＳＳ平板划线培养２４ｈ，随机挑取单个菌落用影印培养法接种于选择平板上（分别含有不同的抗生素，浓度分别为四环素２０ｍｇ／Ｌ，链霉素４０ｍｇ／Ｌ，氨苄青霉素２０ｍｇ／Ｌ），检查细菌对药物的敏感性。凡是在营养琼脂平板上生长，而在含有抗生素的选择平板上不生长的菌落，即为消除了Ｒ质粒的菌落。结果：去污染小鼠动物模型的建立：在口饲四环素、红霉素和利福平３ｄ后，解剖小鼠，取盲肠内容物在ＳＳ平板上划线培养４８ｈ，未见细菌生长，证明小鼠肠道脱污染成功。经口服大肠埃希菌液３ｄ后，解剖小鼠盲肠内容物，用ＳＳ平板分离培养，均得到纯的大肠埃希菌培养物，证明靶细菌定殖成功。黄连在去污染小鼠体内对Ｒ质粒的消除     

链球菌标本制作方法的改进

链球菌是一种致病菌 ,是微生物细菌形态的一种代表 ,也是微生物实验教学不可缺少的标本之一。传统方法制得的标本不清晰 ,很难找到典型的形态 ,为此作了改进。1　材料与方法1 .1　菌种　采用本教研室保存的乙型溶血性链球菌菌种。1 .2　方法　先按常规使菌种复苏 ,再用划线分离法将复苏后的菌种接种于血平板中 ,经 37℃培养 2 4h后 ,根据菌落的形态 ,溶血现象选择典型的菌落。再经革兰氏染色观察细菌的大小、排列 ,挑取形态良好的菌落接种血斜面 37℃培养 2 4h,使之增菌后转种于血清肉汤中 ,37℃培养 2 4h后 ,把上面肉汤轻轻吸除 ,再加入新…     

孕妇、胎儿、新生儿、中青年及老年人补体C_4、C_3和Ig的含量测定

本文对339例不同孕期妇女、胎儿和不同年龄组的健康人进行C_4、C_3和Ig含量检测,提示孕妇C_4和C_3含量无明显变化,但抗体合成低下,IgA含量在各孕期均降低,IgG仅中孕和晚孕降低,可能主要与甲胎蛋白和绒毛膜促性腺激素升高而受抑有关。胎儿除8个月以上者IgG含量与母体相似外,C_4、C_3和IgM、IgA含量均明显低于孕妇,提示胎盘能传递IgG,且随胎龄增长而增多。胚胎期补体合成比Ig更早,C_4、C_3和IgM、IgG含量从胎儿起,IgA从新生儿起逐期增高。老年人IgG、C_4和C_3无明显变化,但IgM降低,提示老年人抗体合成反常,与调节外来抗原刺激反应的T抑制细胞活性增强,而调节自身抗体产生的T抑制细胞活性减弱有关。提示补体量是相对稳定的,并不随孕期抗体合成抑制和老年抗体合成反常而波动。