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成年小鼠雄性生殖细胞的冷冻保存 总被引:1,自引:0,他引:1
在含10%小牛血清(NBS)的DMEM培养基中,分别各添加5%,10%,15%,20%和25%的二甲基亚砜(DMSO),丙二醇(PG),乙二醇(EG)和甘油(G),对成年小鼠睾丸生殖细胞冷冻保存;复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率。结果显示,5%-25%DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为88.5%,88.0%,65.6%及51.3%;5%-25%PG冻存液组的细胞复苏率分别为87.2%,86.4%,79.0%,73.4%及40.1%.;5%-25%EG冻存液组的细胞复苏率分别为6.6%,80.9%,60.8%,51.3%及30.0%;5%-25%G冻存液组的细胞复苏率分别为86.5%,86.3%,65.3%,36.0%及31.4%。其中各抗冻剂5%和10%组的细胞复苏率最高,与15%组相比均存在显著或极显著差异。4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异。DMSO,PG,EG和G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞对的最小损失率分别为4.8%,6.1%,6.7%,6.8%。结果表明,采用慢速冷冻时,DMSO,PG,EG及G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂,最佳使用含量均为5%-10%。成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含5%-10%的DMSO,PG,EG和G的DMEM(含10%NBS)冻存液中,2步慢速降温,液氮储存,37℃水浴复苏,是一种具有较高复苏率的冷冻保存方法。 相似文献
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基因疗法在兽医治疗学中应用的前景阮承迈,杨永胜(解放军农牧大学长春130062)基因疗法是指利用一功能性基因片段来补偿机体缺失的基因。更广义地说是指把基因疗法看成是在体内插入一外源性基因来产生具有治疗作用的蛋白质。后者包含基因疗法不仅能用于治疗先天性... 相似文献
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鸡组织细胞端粒相关序列的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点,设计了一条引物(TELO02)(24nt)。按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法,染色体基因组DNA经HaeⅢ和HinfⅠ两种限制性内切酶酶切后,先进行初级PCR(C1和TELO02)扩增,得到的产物为模板再经过次级PCR(C2和TELO2)扩增,得到的产物用试剂盒回收,并连接到PMD-18-T载体上,转化到JM109受体菌中,从阳性克隆中提取质粒DNA进行PCR和酶切鉴定,确认后进行序列测定,获得了一段243sbp的鸡端粒相关序列。此序列与人第7条染色体基因组末端序列的同源性为63.5%;与鼠端粒旁序列同源性为63.2%;而与MDV基因组序列的BamHⅠ酶切片段76.6%的同源。 相似文献
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盐胁迫下短芒大麦cDNA文库的构建 总被引:2,自引:1,他引:2
为了克隆与研究盐胁迫相关的基因,以盐胁迫后的短芒大麦叶片为材料,用Trizol一步法提取总RNA。Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA。反转录合成第一链cDNA和第二链cDNA。cDNA纯化后,与λZAP表达载体连接,体外包装后得到盐胁迫下短芒大麦cDNA文库,其重组率达96%,滴度为2×10~7pfu/mL,插入片段长度0.5~3.0kb。 相似文献
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增茸灵对中枢神经系统作用的实验研究阮承迈邓旭明宋鲁敏郭金荣程远国张金子(解放军农牧大学药理教研室·长春·130062)在雄鹿发情过程中,常因相互斗殴而致损伤,甚至引起死亡。据临床使用时观察,增茸灵对雄鹿有显著的镇静、减少斗殴次数的作用,为此,本文从中... 相似文献
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