抗锰细菌的分离鉴定及其对生猪养殖粪水中锰的去除效果

为筛选对锰污染环境进行微生物治理的抗锰菌,从湘潭锰矿的矿石和锰尾矿坝采集土样,通过含Mn SO4的固体平板法分离、纯化抗锰细菌,依据形态学特性和16S rDNA序列的系统发育分析对抗锰菌株进行鉴定;抗锰菌株在含0.005、0.010、0.015 mol/L Mn SO4的培养液中生长后,用火焰原子吸收光谱法测定抗锰菌培养液的离心上清液中Mn2+的含量,计算Mn2+的去除率;通过正交试验,以生猪养殖粪污废水原液直接接种抗锰细菌液体菌种,检测抗锰菌的除锰能力。结果表明:1)筛选、分离出1株抗锰菌,将其定名为KM01,经鉴定,该菌为一种沙雷氏菌;2)在含0.005、0.010、0.015 mol/L MnSO4的培养液中,菌株KM01能吸附Mn2+,并以黑褐色沉淀形式沉降析出,28℃下培养液中Mn2+的沉降去除率分别为94.8%、95.8%和89.1%;3)在28℃、p H 7与接种量1%时,生猪养殖废水中Mn2+的沉降去除率分别为94.8%、95.8%和89.1%;3)在28℃、p H 7与接种量1%时,生猪养殖废水中Mn2+的吸附沉降去除率为80.5%,表明抗锰沙雷氏菌KM01在生猪养殖粪污废水的沉降除锰中具有应用潜力。     

肝素修饰酶6-O-磺基转移酶的高产量表达

在化学酶法合成肝素过程中,肝素修饰酶6-O-磺基转移酶(6-OST)在肝素分子中N-乙酰基葡糖胺的C6羟基上进行硫酸化,以达到与肝素相似的硫酸化水平。构建的重组蛋白MBP-6-OST-3的纯化结果表明有较多杂蛋白条带,且蛋白浓度较低。利用定点突变原理设计引物,通过PCR扩增得到突变质粒pMAL-c2X-6-OST-3-linker-His。将突变质粒转化至大肠杆菌Rosetta-gamiB(DE3),实现了MBP-6-OST-3-His蛋白的表达。利用镍柱亲和层析系统将MBP-6-OST-3-His蛋白纯化,并通过SDS-PAGE电泳分析蛋白表达情况。该研究获得了具有高表达、高纯度的MBP-6-OST-3-His蛋白,这为获得高纯度的6-OST-3提供了可靠的方法以及为其应用于化学酶法合成肝素的研究提供了理论基础。