内质网应激在肺泡上皮间质转分化发生中的作用

目的 探讨衣霉素诱导的内质网应激在肺泡上皮细胞-间质转分化(EMT)中的影响及作用机制.方法 以质量浓度为1.25、2.5、5.0 mg/L的衣霉素(TM)分别处理人肺腺癌上皮细胞A549 24 h,MTT法检测细胞活力;RT-PCR和免疫印迹法检测GRP78、CHOP、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、Smad2/3、转录因子Snail的表达;以5μg/L TGF-β1分别处理A549细胞24 h或48h后,免疫印迹法检测GRP78和p-elF2α的表达.结果 1.25 mg/L的TM处理A549细胞24 h后,GRP78 mRNA和蛋白表达升高,CHOPmRNA表达上调;E-cadherin蛋白表达下降,Smad2/3活化,Snail表达上调.而TGF-β1处理A549 24 h,GRP78和p-elF2α表达均上调.结论 衣霉素诱导的内质网应激可介导A549细胞发生EMT,同时EMT发生过程中伴随着内质网应激的发生.     

石油烃降解产甲烷菌系DNA提取方法比较研究

基因组DNA提取方法是评价微生物种群多样性的关键因素,文章研究了不同提取方法对石油烃降解产甲烷菌群结构的影响。分别采用如下五种方法提取纯化DNA:方法 I:玻璃珠振荡破壁、Tris平衡酚(pH值8.0)、氯仿、异戊醇提取,Promega试剂盒纯化法;方法 II:玻璃珠振荡破壁,水饱和酚(pH值5.2)、氯仿、异戊醇提取,Promega试剂盒纯化法;方法 III:进口试剂盒1+核酸自动提取仪法,方法 IV:玻璃珠振荡破壁,核酸自动提取仪提取法;方法 V:国产试剂盒提取法。通过末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)分析细菌和古菌群落结构组成。采用不同方法获得的细菌和古菌的主要菌群结构类似,但是相对丰度存在差异。     

象山港网箱养殖对近海沉积物细菌群落的影响

微生物在有机物质分解、能量转移等生物地化循环中起着重要作用,研究养殖活动对沉积物中微生物多样性的影响对正确评价近海生态系统结构和功能具有重要意义.结合沉积物的理化分析(T、pH、Eh和SO2-),通过T-RFLP(末端限制性片段长度多态性)分析了象山港网箱养殖对近海不同深度沉积物中细菌群落结构和多样性的影响,构建了对照区0-5 cm沉积物样品的细菌16S rRNA基因克隆文库,并进行了系统发育分析.结果表明,近海网箱养殖活动不但使象山港沉积物Eh、pH值等理化性质有所改变,而且使细菌的群落结构也发生了变化,变形细菌纲细菌的相对丰度降低,细菌群落的多样性和均匀度也显著降低,致使近海沉积物细菌群落由多样性高的稳定结构向多样性降低的不稳定结构转变.     

内科胸腔镜在不明原因胸腔积液诊断中的应用价值

目的 了解内科胸腔镜对不明原因胸腔积液患者进行病因诊断的临床应用价值.方法 回顾性分析50例不明原因胸腔积液患者的临床及病理资料,包括内科胸腔镜下活检病理结果、不同类型的胸腔积液其镜下的表现特征.结果 50例不明原因胸腔积液患者中通过内科胸腔镜检查后最终确诊48例,诊断率达96.0％;其中恶性肿瘤性胸腔积液13例(26...     

转录因子FabHLH148参与草莓果实的颜色发育

【目的】探究碱性螺旋-环-螺旋（basic helix-loop-helix,bHLH）转录因子在草莓果实成熟过程中的功能。【方法】基于转录组测序和基因组数据库,克隆FabHLH148基因;分析其理化性质、保守结构域、预测编码的蛋白质结构、系统进化树、亚细胞定位等;采用RT-qPCR检测其在草莓中的时空表达水平,并构建过表达（over expression,OE）和RNA干扰（RNA interference,RNAi）载体,利用农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,观察记录表型,检测FabHLH148表达水平,并测定花色素苷含量。【结果】FabHLH148基因CDS区全长687 bp,编码228个氨基酸,预测蛋白分子质量24.89 ku,理论等电点（p I）为11.65;该基因属于bHLH超家族,因其与二倍体草莓FvbHLH148序列相似度最高,所以将其命名为FabHLH148;亚细胞定位显示,FabHLH148主要定位在细胞核。RT-qPCR结果表明,FabHLH148在草莓不同组织部位均有表达,在果实中有较高表达并随果实成熟表达量显著升高。过表达FabHLH148能够促进果实着色以及花色素...     

草莓乙烯响应因子FaERF003基因克隆与表达模式分析

[目的]为了探明乙烯响应因子FaERF003在草莓果实成熟中的作用.[方法]转录组测序和实时荧光定量PCR检测FaERF003基因在草莓果实不同发育时期的表达水平,利用生物信息学方法分析FaERF003 DNA结合域的氨基酸序列与蛋白质结构,烟草叶片瞬时转化分析FaERF003亚细胞定位.[结果]FaERF003基因CDS区全长894 bp,编码297个氨基酸,预测FaERF003蛋白的分子量为32.9 kD,等电点为8.55,属于AP2/ERF蛋白超家族.FaERF003在草莓果实成熟过程中表达迅速升高且与乙烯前体ACC含量变化趋势相似,推测该基因与乙烯信号转导相关.FaERF003蛋白定位于细胞核和胞质.[结论]FaERF003可能作为乙烯响应因子与乙烯调控草莓果实成熟密切相关.     

延续护理对持续正压通气治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者依从性及疗效的Meta分析

目的 了解延续护理对持续正压通气(CPAP)治疗治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者依从性及疗效的影响.方法 用OSAHS、CPAP、延续护理等有关检索词检索中国期刊全文数据库、维普中文期刊数据库、万方数据库及PubMed数据库中的文献,用软件RevMan5.4对纳入文献进行Meta分析.结果 纳入7篇...     

四量表评分在糖尿病患者中筛查阻塞性睡眠呼吸暂停的效果观察

目的 了解四变量评分在糖尿病患者中筛查阻塞性睡眠呼吸暂停(OSAHS)患者的效果.方法 回顾性 分析490例糖尿病可疑OSAHS患者多导睡眠图(PSG)、Berlin问卷、STOP-Bang问卷(SBQ)、Epworth嗜睡量表(ESS)评分、四量表评分资料,按呼吸暂停低通气指数分为正常组(118例)及轻度(111例)...