嗜吞噬细胞无浆体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立荧光定量PCR方法检测嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum),针对GenBank A.phagocytophilum 16S rRNA基因保守序列(JN558815),设计1对引物1-25F/183-205R。以已知引物EE1/EE2和该引物进行巢式PCR扩增出预期大小片段(205bp),构建含有16S rRNA基因的重组质粒,以质粒为模板构建了标准曲线。以1-25F/183-205R为荧光定量PCR引物,建立A.phagocytophilum荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验和临床样本检测。结果表明,该方法在6.4×10~3~6.4×10~8 copies/μL相关系数为0.99,显示出良好的线性关系;所建方法能特异地检出A.phagocytophilum,对绵羊无浆体、牛无浆体和环形泰勒虫基因组DNA和灭菌双蒸水均无交叉反应;可检测到6.4×10~2 copies/μL的标准质粒DNA,比常规PCR敏感性高100倍;批内及批间变异系数均低于2.0%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法对30份羊血液临床样品检出率比巢式PCR高16.67%。该研究为A.phagocytophilum临床检测和定量分析病原感染程度奠定理论基础。     

河南及重庆、安徽部分地区山羊球虫感染情况与种类调查

采用饱和蔗糖溶液漂浮法对河南省的8个地区、重庆市的云阳县和安徽省的合肥市共1126份山羊粪便样品进行检查,发现1070份球虫阳性样品,总感染率95．03％。对813份阳性样本中的球虫卵囊进行形态学鉴定,共发现12种艾美耳球虫,分别为阿普艾美耳球虫、阿氏艾美耳球虫、艾丽艾美耳球虫、斑点艾美耳球虫、苍白艾美耳球虫、家山羊艾美耳球虫、柯察艾美耳球虫、克氏艾美耳球虫、妮氏艾美耳球虫、山羊艾美耳球虫、羊艾美耳球虫和约奇艾美耳球虫。山羊最多可同时感染9种球虫,多数为2-4种,混合感染率78．7％;6月龄以下、6-12月龄和1岁以上山羊球虫感染率分别为93．3％、97．1％和96-3％,平均OPG值分别为5282．77、3550．71和1507．88;除奶山羊外,不同品种山羊球虫感染无明显差异;舍饲和放牧山羊球虫感染率分别为95．7％和92．8％,平均OPC值分别为3744．35和1028．62。跟踪调查显示,舍饲山羊球虫感染无明显季节性,但夏秋季节球虫感染强度高于冬春季节。     

六种试剂盒提取血液基因组DNA效果比较

为筛选一种高效、快捷的血液基因组DNA提取试剂盒,采集24份新鲜西藏绵羊血液样本,选用6种市售商业化试剂盒（LifeFeng柱式试剂盒DK601和非柱式试剂盒DK602,康为世纪非柱式试剂盒CW0544和柱式试剂盒CW0546,上海生工非柱式试剂盒SK8224和柱式试剂盒SK8254）,比较所提DNA的浓度、纯度、得率以及对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA进行巢式PCR扩增,综合评价不同试剂盒DNA提取效果.结果表明,应用LifeFeng柱式试剂盒DK601提取的DNA浓度和纯度均最高,得率较高,分别达到75.63 ng/μL、1.894（OD260/OD280）、18.91 ng/μL;且嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因的PCR扩增条带清晰度最优.因此,LifeFeng DK601可作为提取绵羊血液基因组DNA及嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）病原鉴定的首选试剂盒.     

河南省规模化兔场兔贾第虫感染情况调查

为了解河南省规模化兔场兔贾第虫感染情况及评价其公共卫生意义,采用卢戈氏碘液染色法对河南省6个地区9个规模化兔场共1 027份粪便样品进行检查,发现贾第虫感染率为7.8%,其中3～7月龄兔贾第虫感染率最高,为11.2%;不同品种兔感染情况存在一定差异,以肉兔感染率最高,为11.3%。调查结果表明,河南省规模化兔场兔贾第虫感染较为普遍,应加强其综合管理和人兽共患防控措施。     

猪囊尾蚴循环抗原和排泄分泌抗原研究进展

猪囊尾蚴病是由带科(Taeniidae)带属(Taenia)的猪带绦虫(有钩绦虫)(Taenia solium)的幼虫-猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)寄生于猪的肌肉和其他器官中而引起的一种人畜共患寄生虫病,俗称囊虫病。该病主     

某种猪场猪疥螨感染情况调查及治疗试验

采用显微镜直接检查法和虫体浓集法,对河南某种猪场的保育猪、育肥猪和种母猪疥螨感染情况进行了调查,结果其感染率分别为55.0%、67.2%和40.0%,平均感染率为58.82%。分别应用1%伊力佳、阿力佳注射剂按0.3 m g/kg体重1次皮下注射,或预混剂按1.5 kg/t料混饲连喂1周或2周、或按2 kg/t料混饲连喂1周对疥螨病猪进行治疗,用药后15 d,螨虫转阴率均达100%,平均病变记分减少率为84.83%(81.6%~88.4%),表明上述2种药物不同剂型和用法、用量对猪疥螨病均具有良好疗效。建议规模化猪场使用1%阿力佳预混剂,按1.5 kg/t料,混饲连喂1~2周防治猪疥螨病。     

中药外用剂型及应用

中药的应用在我国有悠久的历史,在中医理论指导下衍生出了一系列种类丰富的中药外用剂型,如:散剂、膏剂、酒剂等。随着科学技术的进步,中药外用剂型种类逐渐增多,如:栓剂、膜剂、喷雾剂等。对常用传统和当代新的中药外用剂型及其临床应用进行综述,以期为研发外用中药新制剂提供参考。     

不同剂量达虫净对山羊自然感染线虫的驱虫效果试验

按体重5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg不同剂量的达虫净对自然感染线虫的山羊进行拌料饲喂驱虫,同时用0.2mg/kg阿维菌素一次皮下注射作药效对照,并设空白对照组。分别于用药前及用药后第7天取粪便进行虫卵计数。用药后第2天起每天检查由粪便中驱出的虫体数至查不出为止。结果表明:各剂量组药物对肺线虫虫卵减少率分别为100%,100%,100%,83.3%,虫卵转阴率分别为100%,100%,100%,66.7%;对捻转血矛线虫等其他线虫虫卵减少率分别为88.9%,100%,100%,100%,虫卵转阴率分别为66.7%,100%,100%,100%。用药后第2天病羊开始排虫,第3天为排虫高峰,第4天排虫减少,第5天仅见有少量虫体,第6天以后未再见虫体排出。     

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。     

鹌鹑隐孢子虫流行病学调查及动物感染试验

为掌握畜禽隐孢子虫病在河南省的流行动态,作者于2003年用饱和蔗糖溶液漂浮法检查了郑州、焦作2市7个鹌鹑养殖场429份粪便样品,结果有5个鹌鹑场隐孢子虫感染为阳性,根据卵囊形态初步鉴定1种为贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi),另1种为火鸡隐孢子虫(Cryptosporidium meleagridis);总阳性率为14．69％(63／429),其中感染贝氏隐孢子虫的阳性率4．66％(20／429),火鸡隐孢子虫的阳性率为10．02％(43／429),并分别用2种卵囊试验感染鹌鹑和雏鸡研究其致病性,观察了2种隐孢子虫在鹌鹑体内的排卵囊规律,以及火鸡隐孢子虫在免疫抑制雏鸡和非免疫抑制雏鸡体内的排卵囊规律。