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1.
【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104(WT)为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系(ZmIBH1-1-OE);通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理(20% PEG6000),进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs);结合DAP-seq(DNA affinity purification sequencing)分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV(integrative genomics viewer)分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T3代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T4代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性)均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology(GO)功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-MZmSYCOZmbHLH54ZmGlu-r1ZmCLPB3ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12ZmCYSZmCYSBZmERF-107ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-MZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。  相似文献   
2.
猪舍颗粒物对肺泡巨噬细胞功能的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
猪舍空气环境颗粒物与猪的健康和生产密切相关,是猪呼吸道疾病发生的重要原因之一。猪舍内颗粒物携带内毒素、重金属、致病菌等多种有毒有害物质,成分复杂,毒性大,可诱发肺部炎症反应,但具体机制尚不十分清楚。肺泡巨噬细胞作为肺中的游离免疫细胞,在吞噬和清除颗粒物的过程中发挥着重要作用。本文从猪舍颗粒物的特征及成分入手,综述了颗粒物对猪的生长性能和呼吸道健康影响,并着重阐述了颗粒物对肺泡巨噬细胞功能的影响及其调控机制。颗粒物可通过降低肺泡巨噬细胞吞噬能力、改变细胞极性以及激活TLR4-NF-κB/AP-1信号通路,影响肺泡巨噬细胞的先天免疫,其亦可作为抗原呈递细胞引发适应性免疫反应。本文可为今后对猪舍内颗粒物的深入研究提供参考依据。  相似文献   
3.
浙东白鹅是我国著名的中型肉鹅地方良种,其早期生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强,为充分挖掘浙东白鹅的遗传潜力,对其进行产业化开发,我们进行了浙东白鹅种质测定试验。1材料和方法1.1试验材料试验鹅来自象山县种鹅场的浙东白鹅选育种群的种苗鹅。1.2试验方法浙东白鹅种苗鹅出壳  相似文献   
4.
烤烟漂浮育苗技术效果初探   总被引:2,自引:0,他引:2  
通过增设漂浮育苗限制因子试验,得出思南县漂浮育苗技术为:播种期在3月上旬能满足水温要求,需在池底用10 cm生牛粪作酿热物;基质的装填应使基质手捏成团,落地全散为宜;当种子出苗后必须经常进行晾盘,累计时间在240 h以上("小十字前"不少于80h);剪叶次数一般4~6次,且配合施用壮苗素效果较好;注意苗肥、硫酸铜的施用时间、浓度和次数.  相似文献   
5.
苏北地区杨尺蠖发生规律及其防治汤吉利刘奎,陈德岭陈继远,陈世德(江苏省淮阴市森林病虫防治检疫站223001)(江苏省泗阳县森林病虫防治检疫站)(江苏省宿迁市森林病虫防治检疫站)杨尺蠖Apocheimiacinerarius又名春尺蠖。近十年来,江苏淮...  相似文献   
6.
利用1990-1991年甘肃省第2轮番茄区试两年12点次试验资料,应用多年多点方差分析方法,分析了品种效应,地区适应性、年际环境条件的敏感性,并用灰色关联理论对其早疫病病情指数,单果重、固形物含量进行关联分析,结果表明:陇番7号丰产性突出,稳定性好,适应性广,是一个综合性状优良的中晚熟杂交种,适宜在我省推广种植。  相似文献   
7.
导入AGPase基因的转基因可育水稻及其经济性状的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
以农杆菌介导法将淀粉合成关键酶AGPase(腺嘌呤二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶)基因导入云南地方优质水稻合系35,38,39,41,42中,获得了大量的可育转基因植株。PCR扩增检测,外源基因已稳定整合进水稻基因组中。大量的农艺性状及淀粉含量研究表明,转基因水稻种子的千粒重比对照明显提高,但总淀粉含量没有显著变化。  相似文献   
8.
农业产业化经营作为一种组织与机制的创新,打破了城乡分割、产业分离、行业垄断和地区封锁,把农业的产前、产中、产后有机联结起来,形成一个整体,实现了一、二、三产业持续稳定地增长,是优化县域经济结构,实现农业增效,农民增收,企业增利、财政增税,推动县域工业化和城  相似文献   
9.
佟屏亚 《种子科技》2004,22(4):191-193
(上接第3期第128页) 3他们正在成为舞台上的政治新秀 市场经济给予不同人以不同的体验:它可以是润雨细无声的,当你意识到它的来临时,一切都已经不再是从前的模样;也可以是疾风暴雨的,在大浪淘沙之中,要么被抛上浪尖,要么跌入谷底.变化是市场的常态,也是社会的常态,种业老板的际遇所揭示的就是这样的常态.作为构成社会的最基本单位,包括中国规模最小的民营种子企业家,当他们愿意把自己的命运和财产融入市场竞争的起伏浪潮之中的时候,可以认为这个社会是大有希望的.  相似文献   
10.
泛议职称评价体系及其改进建议   总被引:1,自引:0,他引:1  
技术职称标志着农业科研人员的工作成绩、科研能力和学术水平,代表着一种荣誉和地位,也明示或暗示着相应的行政级别和福利待遇。中国农业科研人员职称评定工作经历了坎坷崎岖的道路,特别是文化大革命期间的职称评定中断长达10年之久,以致在20世纪80年代初期出现了所谓的“青黄不接”和90年代出现的“人才断层”。进入21世纪,当整个社会弥漫着浮躁气氛时,农业科研领域从人才“断层”发展到职称“跃进”。技术职称评定工作的弊端及其凸现后果已经到了非改不可的地步。一、回顾技术职称评定工作的历程我国的技术职称评定工作经历了50多年。从存…  相似文献   
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