3D模型在线虫学教学中的应用

线虫标本观察是帮助学生掌握线虫形态的一个重要教学环节,但标本的保存和观察方法存在着一定的局限性。为解决该问题,在线虫学教学中引入线虫3D模型,3D模型可由学生在电脑上自由操作,通过鼠标拉动3D图像可从任意视角全方位浏览线虫,而且3D模型还可打印出来,真实感强,可长期保存。利用3D模型进行线虫学教学增强了线虫形态学教学的趣味性与直观性,是一种新的教学方法。     

进境澳大利亚豌豆细菌性萎蔫病病原菌的分离鉴定

 2008年3月自澳大利亚进口的豌豆种苗病变部位分离到致病性菌株,该菌株能引起豌豆茎部、卷须萎蔫腐烂,叶片褪绿等症状。针刺接种豌豆,发生的病变状态与自然发病的症状相同,且在接种发病植株中又分离到形态上一致的病原菌,得到了柯赫法则的验证。经形态特征、培养性状、生理生化及16S rDNA序列分析,鉴定其为桃色欧文氏菌(Erwinia persicina)。这是我国首次从进境豌豆中检出该病害。     

广州地区观赏植物寄生线虫初步鉴定与防治

从广州的13种观赏植物寄主上采集的30份样品中,初步鉴定出8个属的花卉寄生线虫,分别为螺旋属、平滑垫刃属、长针属、剑属、沼泽垫刃属、滑刃属、肾状属和短体属,其中螺旋属和长针属的寄主范围较宽,是广州花卉的重要寄生线虫。并提出了线虫病害的综合防治策略。     

从尼日利亚进境的芋头中截获最短尾短体线虫

广东检验检疫技术中心植检实验室于2008年4月从尼日利亚进境的芋头中分离到数条短体线虫,经纯培养、形态观察、测量,以及对rDNA-ITS、D2D3区序列的扩增、克隆、测序分析,鉴定为最短尾短体线虫(Pratylenchus brachyurus(Godfrey,1929)Filipjev & Schuurmans Stekhoven,1941)。该线虫在国内局部分布,属于检疫性线虫,在系统内首次截获。     

荷兰进境肖竹芋中香蕉穿孔线虫的检疫

2003年6月下旬,广州出入境检验检疫局检疫人员在白云国际机场现场随机抽取了进口的荷兰产肖竹芋苗(Calathea)部分样品回实验室检验,在检验过程中,采用浅盘法分离了植物根系和栽培介质中的线虫,在检获的线虫中发现有一些短体科寄生线虫,该线虫经我们对其形态特征进行细致的观察,鉴定为我国一类禁止进境检疫性线虫-香蕉穿孔线虫(Radopholus similis Thorne,1949).     

Duplex PCR 快速检测松材线虫

利用duplex PCR技术对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)与拟松材线虫(B. mucronatus)的rDNA部分核苷酸序列扩增.根据松材线虫与拟松材线虫的ITS1序列区别,设计出特异性引物,检测松材线虫的存在;在5.8S,28S保守序列区设计通用引物,检测伞滑刃线虫的存在.     

马铃薯金线虫和白线虫DNA特异扩增产物的克隆与鉴定

通过采用Fullaondo（1999）研究的特异引物检测方法,对来自英国和比利时的两个马铃薯金线虫（Globodera rostochiensis）种群和英国的一个马铃薯白线虫（G.pallida）种群的DNA进行扩增,其产物以大肠杆菌（Eschetichia coli）为受体菌,经过连接、转化和克隆纯化,筛选获得阳性克隆.经PCR鉴定和测序,英国和比利时的马铃薯金线虫种群的特异性谱带分别是357bp和350bp,而英国的马铃薯白线虫的谱带是782bp,与Fullaondo等人研究报道结果基本相符,从而鉴别出来自不同地理种群的马铃薯金线虫和白线虫.     

格木寄生线虫中国新记录种——卡勒萨隐皮孢囊线虫Cryphodera kalesari

在对广东省主要珍贵树种上的线虫进行调查时从格木Erythrophleum fordii上分离到一种隐皮孢囊线虫,经形态特征观察和测量数据分析,将其鉴定为卡勒萨隐皮孢囊线虫Cryphodera kalesari。其诊断特征为:雌虫椭圆形至近球形,头部具有1个唇盘和2～3个唇环,口针长33.6～37.8μm,阴门唇突出,阴门与肛门之间区域凹陷,肛阴距为42～72μm;2龄幼虫头部具1个明显的唇盘和3个唇后环纹,口针长24.8～29.5μm,口针基部球前缘凹陷,侧区3条侧线,尾长圆锥形,长38～53.5μm,尾末端细圆,透明尾长17.1～25.1μm,侧尾腺孔位于肛门后2～5环;雄虫未发现。本研究首次获得了卡勒萨隐皮孢囊线虫的rDNA(LSU D2D3和ITS)序列,为此线虫的鉴定提供了可靠的分子数据。本研究还分析了卡勒萨隐皮孢囊线虫与本属其他种类的系统进化关系。卡勒萨隐皮孢囊线虫为中国的地理新记录种。格木为隐皮孢囊线虫的新寄主。     

菜豆晕疫病菌的检测技术研究

通过选择性培养基的筛选,利用菜豆萎蔫毒素基因序列扩增引物和菜豆萎蔫毒素基因缺失菌株独有的ORF6序列的扩增引物,采用双重PCR技术实现了菜豆晕疫病菌的快速检测。