向日葵肌动蛋白基因的cDNA克隆及进化分析

本研究以向日葵（Helianthus annuus)为材料，提取其总RNA，根据植物肌动蛋白基因编码区的5′和3′末端设计简并引物，利用RT-PCR技术，用5′RACE试剂盒扩增出向日葵肌动蛋白基因编码区全长，以豌豆肌动蛋白cDNA作探针的Southern杂交检测表明扩增出了肌动蛋白基因，将所获片段克隆到pGEM-T载体后进行测序，所得序列与GenBank已知肌动蛋白基因序列的相似性均在60%以上，其中与之相似性最高的锦葵为85%；与主要高等植物肌动蛋白氨基酸序列的相似性达80%以上，根据氨基酸序殖的相似性绘制主要高等植物肌动蛋白的系统树（种系树），表明向日葵肌动蛋白与锦葵肌动蛋白可能由同一祖先进化而来。     

玉兰肌动蛋白基因的克隆与序列分析

本研究选取玉兰（Magnolia denudata Desr.)为材料，提取总RNA，利用设计的肌动蛋白编码区两端的特异性引物和5'RACE试剂盒，扩增出肌动蛋白编码的cDNA基因。以豌豆卷须肌动蛋白基因作探针，通过Southern杂交进行检测，证明同源性很高。将所获得序列克隆到pGEM-T载体上进行测序，测序结果在GenBank中进行查询，并与其他高等植物肌动蛋白基因序列进行了分析。     

豌豆肌动蛋白基因在大肠杆菌中的表达

高等植物细胞内含有肌动蛋白，但含量较低，难于提取及进行进一步研究，我们用PCR的方法扩增肌动蛋白cDNA，并克隆到表达质粒pTrpHis，然后转化大肠杆菌DH5α，在IPTG诱导下，肌动蛋白表达在包涵体中，在没有IPTG诱导时，肌动蛋白表达在胞液中。     

果实菠萝蛋白酶的动力学研究

用SephadexGSO凝胶过滤纯化果实菠萝蛋白酶在SDS-聚丙烯酸胺电泳上表现为一条带。在以酪蛋白为底物,PH7．2～35℃条件下,果实菠萝蛋白酶的KM值为0．7,Vmax为134．2mg·mL-1·min-1。果实菠萝蛋白酶的最适温度为55～65℃（以酪蛋白为底物,PH72）,最适PH为7～9（以酪蛋白为底物,35℃）,活化能△G为111．67kJ·mol-1。     

大麦叶绿体捕光叶绿素蛋白的结构和性质

本实验以 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,从大麦叶绿体类囊体膜中得到了五条色素带,其中三条为捕光叶绿素蛋白 LHCP1,LHCP 2和 LHCP3。三种 LHCP 的室温吸收光谱的红区最大吸收在670nm 和654nm,蓝区吸收峰在439nm-140nm 和464-466nm。室温荧光发射在680nm 附近。它们的叶绿素 a/b的比值为0.7-1.0。LHCP 1由59KD 和27KD 的多肽组成,LHCP 2由59KD 和53KD 和27KD 的多肽组成。LHCP 3由33KD 和27KD 的多肽组成。三种捕光叶绿素蛋白(LHCP)经胰蛋白酶消化后所得到的肽谱十分相似,表明它们可能有非常相似的一级结构