PCR和IFA测定猪圆环病毒2型半数细胞培养感染量的比较

采用聚合酶链式反应（PCR）和间接免疫荧光法（IFA）测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID₅₀),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID₅₀,并采用荧光定量PCR（Real-time PCR）法对试验结果进行验证。对于同一病毒样品,IFA法测出的TCID₅₀为10^6.5/mL,PCR法测出的TCID₅₀为10^5.0/mL,结果表明:IFA法比PCR法更敏感,更适宜用于测定PCV2的效价。     

鸡新城疫复合灭活苗的研制

鸡新城疫(ND)是由副粘病毒引起的高度接触性传染病，给养禽业造成极大危害。本病特征是口咽部蓄积大量粘液，有时流出，呼吸困难，并发出湿性呼噜声，排暗绿色恶臭稀粪。鸡新城疫病毒有不同毒株，毒力有强、中、弱之分，对呼吸、消化和神经器官的亲嗜性也有所不同。为此，我们研制了鸡新城疫强化复合灭活苗。     

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗保存期试验

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗现行规定在2～8℃贮存期为7个月.为了探究该疫苗能否在2～8℃贮存1年仍符合〈中华人民共和国兽用生物制品质量标准〉中猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗质量标准（以下简称质量标准）,本试验将3批猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃贮存至8、10、12、14个月,然后按质量标准抽样做物理性状检验、无菌检验、安全检验和效力检验.结果表明,猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃保存1年后,各项检测均符合质量标准.     

ST贴壁细胞悬浮驯化及应用

为将ST贴壁细胞通过自主驯化,使其能在ST-S细胞无血清培养基中悬浮生长且能稳定传代,在摇瓶中实现高密度生长,并应用于猪伪狂犬病毒(PRV)悬浮培养,经ST-A低血清培养基适应培养,对一株贴壁的ST细胞进行了无血清的全悬浮驯化,并将PRV在悬浮细胞中连续盲传培养。结果显示:ST悬浮细胞能在无血清培养基中传代,培养48 h至第3代后,所能达到的最终细胞密度为3.00×10^(6 )cells/mL以上;PRV连续培养至第5代,毒价可达到109.0 TCID50/mL。结果表明,用专用培养基可使ST贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于PRV悬浮培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高PRV增殖效率奠定了技术基础。     

一株猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其对不同动物的致病性

为了解变异后伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的致病性,采用细胞培养技术从病料中分离PRV,通过PCR方法对PRV相关基因进行扩增,对毒株进行特异性试验和病毒滴度的测定,并通过动物试验对PRV的致病性进行了研究.结果表明:通过PCR可扩增出大小与预期相符的PRV gG基因片段、gE基因片段以及...     

仔猪黄痢K88、K99基因工程菌、987P无毒菌三价苗的研制

仔猪黄痢主要危害1月龄以内的新生仔猪,尤其是1周龄内仔猪的发病率和死亡率最高,多以急性、水样腹泻为特征,预防仔猪黄痢最有效的措施是采用疫苗对怀孕母猪免疫接种,新生仔猪通过吮吸母猪初乳获得被动免疫。本疫苗是通过分别带有K88、K99、987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌,接种于适     

鸡新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征灭活苗的研制

鸡新城疫系副粘病毒属 ,不同的毒株诱发疾病的严重程度也不一样 ,呈全球流行。传染性支气管炎是由冠状病毒引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病。减蛋综合征是由腺病毒引起 ,可使产蛋鸡群产蛋下降 ,产蛋率降低 2 0 %～ 3 0 % ,甚至 5 0 %。这三种疫病一旦流行和暴发 ,将会对养鸡业造成极大的经济损失。为了能有效控制这几种疫病 ,我们研制出复合鸡新城疫、多价传染性支气管炎、减蛋综合征油乳剂灭活三联苗。通过实验室攻毒保护试验表明 :该疫苗对这三种鸡病具有良好的预防效果 ,可保护整个产蛋期。1　材料与方法1 .1　材料毒株 :新城疫强…     

猪伪狂犬病毒gE基因缺失毒株的构建及其免疫原性的研究

通过CRISPER/Cas9编辑技术编辑实验室分离得到的PRV-SX株的gE基因,并利用蚀斑纯化等方法得到gE基因缺失的突变株。通过T7E1核酸内切酶及测序来鉴定gE基因的缺失,并对gE基因缺失毒株的免疫效果进行了研究。结果表明:应用CRISPER/Cas9编辑技术成功得到了gE基因缺失毒株,用这一毒株制备疫苗免疫仔猪,免疫后0 d、14 d、28 d、42 d、56 d PRV gE抗体均为阴性;PRV gB抗体呈阳性,在42 d时达高峰。     

囊素对猪口蹄疫灭活疫苗的免疫增强作用

用提取的天然囊素（10ug／mL）和O型口蹄疫灭活疫苗协同免疫45日龄仔猪，研究了其对。型口蹄疫灭活疫苗免疫效果及仔猪增重的影响。将32头健康45日龄仔猪随机分为4组，0．5mL疫苗＋囊素免疫2次（Ⅰ）组、1、0mL疫苗＋囊素免疫2次（Ⅱ）组、1．0mL疫苗＋囊素免疫1次（Ⅲ）组和1．0mL疫苗免疫2次（Ⅳ）组（疫苗对照组），用液相阻断酶联免疫吸附试验（LB—ELISA）检测各组猪免疫前及一免后第14、28、42、60、74、88、102d的口蹄疫血清抗体效价并称重。结果。Ⅱ组抗体水平显著高于Ⅳ组（P〈0．01），Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组间差异不显著（P〉0．05）；一免后第60～110d仔猪平均日增重囊素组明显高于对照组（P〈0．05）。结果表明，囊素可以提高口蹄疫灭活疫苗的免疫原性，提高猪增重，促进生长发育。