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产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达 总被引:4,自引:0,他引:4
应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a( )中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选得到可诱导表达K99抗原的工程菌株。经IPTG诱导,分离纯化K99重组蛋白,以其免疫新西兰大白兔,获得重组蛋白的兔抗血清;免疫印迹分析表明,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的K99强毒株姓明显的抗原抗体反应。 相似文献
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K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备 总被引:4,自引:1,他引:4
利用PCR技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的K88菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到E.coli表达载体pET28a(+)中,构建了该基因的原核表达载体p8828,导入E.coliBL21(DE3),得到工程菌株。DSD-PAGE分析结果显示,经IPTG诱导,该亚基基因高效表达出重组K88菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的30%。用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备K88菌毛 相似文献
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