罗伯茨虫草及其无性型活性成分分析

以10株野生罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢液体发酵菌丝体为研究对象,采用比色法和高效液相色谱法（HPLC）分别测定其多糖、甘露醇、尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷及虫草素等活性成分含量,并与西藏那曲野生冬虫夏草作比较。结果表明,罗伯茨虫草尿嘧啶含量高于冬虫夏草,尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷含量与冬虫夏草接近,而多糖和虫草素含量与冬虫夏草差距较大。在10株罗伯茨被毛孢中,菌株HRT06的多糖、尿苷、鸟苷及腺苷含量最高,与其余菌株有显著性差异（p〈0.05）,且菌株HRT06的腺苷含量为0.140 mg·g-1,达到中国药典冬虫夏草腺苷含量不得少于0.100 mg·g-1的规定,可以筛选作为优良菌株加以利用。本研究测定罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢活性成分含量,为综合评价罗伯茨虫草应用价值及其开发利用提供科学依据。     

中国东北林蛙（Rana dybowskii）遗传多样性与分化研究

本文利用11个微卫星多态位点检测东北林蛙(Rana dybowskii)的遗传多样性和种群遗传结构。6个东北林蛙种群的75个个体分布于中国的小兴安岭和长白山地区。11个位点在所有种群中得到的等位基因数为2～10个不等,平均5.6个;平均期望杂合度(HE)为0.572,属于中度多态。基因分化系数(FST)分析表明小兴安岭和长白山地区的种群间遗传分化显著(P<0.001),基于Nei's DA遗传距离构建的UPGMA系统树和AMOVA的结果进一步验证了结论的准确性。因此, 建议将分布于小兴安岭和长白山的东北林蛙划分为两个单独的管理单元加以保护和管理。图2表7参46。     

银狐Gdf8基因cDNA的克隆与序列分析

根据已报道的犬科狗的Gdf8基因cDNA编码序列设计一对引物,利用RT—PCR技术扩增银狐的Gdf8基因cDNA的编码序列,将PCR产物连接到质粒pMD18-T载体上,然后转化到JM109大肠杆茵中,得到阳性克隆,同时进行序列的测定和分析。测序结果与已报道的Gdf8基因cDNA编码序列的大小相同,为1128bp。该序列与狗的同源性为99．2％,仅有9个核苷酸差异,推断的氨基酸序列仅有3个差异。     

产不同色素古尼拟青霉菌株功效成分分析

为比较产不同色素古尼拟青霉菌株菌丝体功效成分的差异，本研究对产不同色素古尼拟青霉菌株及对应古尼虫草样品进行试验分析。观察其菌落形态和菌落颜色；用紫外分光光度法测定多糖和D-甘露醇含量；用HPLC法测定虫草素、腺苷、肌苷、胸苷、鸟苷、尿苷6种核苷类成分含量。结果显示，菌落背面绿色的菌株pgjt03，腺苷含量是古尼虫草样品YHCGGB0145的6倍，且虫草素、胸苷、鸟苷、尿苷含量也均达到最高，与它对应的古尼虫草样品YH—CGJT0148虫草素、腺苷、鸟苷、尿苷含量均高于其它古尼虫草；而菌落背面浅灰色的菌株pNt01，核苷类成分含量均低于其他菌株。说明古尼拟青霉产色素与功效成分之间有一定的相关性，古尼拟青霉所产色素颜色越深，功效成分的含量相对越高。通过该研究指出，菌落颜色可作为筛选古尼拟青霉菌株高产功效成分的标志之一，且菌落背面绿色的菌株pgit03，性状优良，生长较快，可作为潜在的生产菌株。     

鞣制皮张DNA的提取

采用5种方法从鞣制的野猫(Felissilvestris)皮和漠猫(F.bieti)皮中提取DNA,用Cytb基因的通用引物进行PCR扩增,并对扩增结果进行测序,以检验提取效果。结果显示,鞣制皮张中的DNA含量少,高度降解,且含有大量的酶抑制物。用酚-氯仿法可以得到DNA,但需要采用DNAIQTM系统(Promega)的磁珠纯化策略进一步彻底纯化才能达到最佳扩增效果。此外,PCR引物设计时应尽量缩短扩增片段长度以便提高扩增成功率。