森林草莓FvWRKY22基因的克隆及表达分析

【目的】为了探究FvWRKY22在草莓抗重茬病中的调控作用。【方法】以森林草莓‘Hawaii 4’为材料,克隆FvWRKY22并对其序列进行生物信息学分析,利用qRT-PCR分析FvWRKY22在草莓不同组织中的相对表达量以及在受到重茬病诱导后该基因的表达模式。【结果】从森林草莓‘Hawaii 4’根部的cDNA文库中克隆到FvWRKY22基因,该基因在草莓根、茎、叶中均有表达,但在果实中的表达量相对较低;经过重茬病菌的处理后,FvWRKY22的表达量呈现先增加再降低再增加再降低的表达趋势。【结论】推测FvWRKY22基因可能与草莓重茬病的抗性有关。     

草莓果实酵母双杂交文库的构建及FvM4K1互作蛋白的筛选

通过构建草莓不同发育时期果实的cDNA文库,筛选与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1互作的蛋白,探究FvM4K1参与调控果实发育的分子机理。以森林草莓(Fragraria vesca‘Hawaii 4’)为材料,提取不同发育时期果实的总RNA,建立cDNA文库,其库容为9.6×10⁶ CFU,重组率96%,插入片段平均长度大于1 000 bp。同时构建诱饵载体pGBKT7-FvM4K1,并检测其在酵母中无自激活活性。利用共转化方法,从文库中筛选到13个与FvM4K1互作的蛋白。通过Gene Ontology(GO)通路注释表明候选互作蛋白主要集中在细胞代谢过程及具有催化活性的分子过程。候选蛋白预测功能主要集中在调控花粉发育和花粉管伸长以及开花时间等。筛选到的13个蛋白编码基因在果实发育过程中表达模式不同,其中4个蛋白预测功能与草莓果实发育密切相关。