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[目的]棉花磷脂酶D(GhPLDα)基因的克隆、序列功能结构域分析及表达.[方法]以陆地棉胚珠和纤维为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到PLDα基因的cDNA片段,将其构建到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,利用分光光度法检测酶活性,采取RT-PCR方法检测基因表达.[结果]从发育的棉花胚珠和纤维混合材料中克隆得到的磷脂酶基因的开放读码框为2 421 bp,编码包含807个氨基酸的蛋白质,分子量约为88 kDa.通过同源序列比对和功能结构域分析,GhPLDα具有典型的磷脂酶D家族(HKD)结构域,同时还存在蛋白激酶C结构域2(C2结构域).构建了pET28a-GhPLDα原核表达载体;获得分子量约为88 kDa左右的重组蛋白GhPLDα.半定量RT-PCR结果表明GhPLDα基因可能参与棉花胚珠与纤维发育过程.[结论]GhPLDα基因的克隆、序列分析和表达为进一步研究棉花GhPLDα基因在胚珠和纤维发育中过程的功能奠定了基础.  相似文献   
2.
国家质检总局从2002年3月1日起在全国范围内集中开展打击假冒伪劣农资活动专项战役以来 ,全国各地质监部门共查获假冒伪劣农药、复混肥、农机及其配件货值8282万元。在打假过程中发现 ,当前农资造假突出表现在3个方面 :1 复混肥和低浓度磷肥有效含量不足这是农资市场上最突出的问题 ,3月份全国共立案查处假冒伪劣复混肥和磷肥案件1546起、货值6603万元 ,占查处农资案件总数的59 %和总货值的79 6 %。2 销售过期农药和生产销售假冒他人厂名厂址农药这种情况也比较严重 ,其手段是大量收购过期失效的农药 ,用非法印…  相似文献   
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