基于转录组信息的叶用莴苣MADS-box转录因子家族分析

[目的]基于转录组数据鉴定分析叶用莴苣MADS-box基因家族,筛选高温促进叶用莴苣抽薹过程中MADS-box家族特异性表达的基因,以期为叶用莴苣高温诱导抽薹的分子机制鉴定提供理论依据.[方法]从叶用莴苣转录组数据中鉴定获得MADS-box家族转录因子并进行生物信息学分析,利用qRT-PCR技术分析叶用莴苣易抽薹品种'S39'在高温处理下MADS-box基因的表达模式.[结果]在叶用莴苣转录组中共鉴定到14个MADS-box转录因子,其编码的蛋白质含有212～253个氨基酸,蛋白质大小为24026.50～29380.16 Da,理论等电点范围为5.27～9.44,其中2个为稳定蛋白,12个属于不稳定蛋白,均为亲水性蛋白.亚细胞定位预测结果显示所有蛋白质均定位于细胞核.qRT-PCR结果表明,在高温处理下,LsMADS32表达量无显著规律;Ls-MADS16和LsMADS37表达总体呈下降趋势;LsMADS5,LsMADS14,LsMADS15,LsMADS29,LsMADS35,LsMADS39,LsMADS43,LsMADS45,LsMADS48,LsMADS54和LsMADS56表达趋势基本相同,呈先上升后下降趋势,LsMADS15在高温处理7d后达到峰值,其他基因在高温处理5d后达到峰值,其中LsMADS54在高温处理5d后骤升1000倍,LsMADS56在高温处理5d后骤升70倍.[结论]MADS-box家族中的部分成员可能与高温诱导抽薹密切相关,LsMADS54和LsMADS56是叶用莴苣响应高温诱导后抽薹开花调控网络中的潜在的重要转录因子.     

病毒诱导基因沉默对叶用莴苣内源激素含量的影响

[目的]探明叶用莴苣在受到病毒诱导的基因沉默后,脱落酸、生长素、茉莉酸、赤霉素四种内源激素含量作何变化.LsZFP1在叶用莴苣中行使的功能.[方法]叶用莴苣'PS-11'为材料,经病毒诱导LsZFP1基因沉默后,采用酶联免疫法测定叶用莴苣内源激素的含量变化.[结果]携带LsZFP1基因的病毒载体(TRV-LsZFP1)处理的植株中脱落酸含量为406.58μg/L,空载(TRV)处理植株中脱落酸含量为329.47μg/L,空白对照含量为284.69 μg/L,TRV-LsZFP1处理植株与空白对照植株相比脱落酸含量增加了42％.TRV-LsZFP1处理植株茉莉酸含量为1311.92 μg/L,空白对照为946.72 μg/L,显著增高了365.2 μg/L,叶中生长素含量为93.04 μg/L,略高于空白对照;TRV-LsZFP1处理植株中赤霉素含量为460.39μg/L,相比空白对照下降了39％左右.[结论]叶用莴苣经VIGS处理后,受侵染植株中脱落酸、茉莉酸、生长素三种激素较空白对照含量上升,赤霉素和空白对照相比含量下降,4种内源激素含量较空白对照均有变化,表明叶用莴苣受病毒侵染受伤后,通过调节内源激素含量来适应胁迫.