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[目的]了解牛瘤胃内微生物的变化。[方法]以琥珀酸丝状杆菌为对象,根据16S rRNA序列分别设计引物。从牛瘤胃液提取总DNA,扩增琥珀酸丝状杆菌的DNA片段,并连接在pDM-18T载体上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模版进行RT-PCR。[结果]扩增的目的片段与已知的菌种相应片段的同源性为100%。以不同稀释度的重组pMD-18T为模板建立的RT-PCR扩增曲线有明显差异,绘制标准曲线的相关系数接近1,熔解曲线呈单一峰值。[结论]成功建立了琥珀酸丝状杆菌的实时荧光定量PCR方法,为进一步研究瘤胃内微生物变化奠定基础。 相似文献
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旨在建立一种有效的定量方法监测肉牛在运输前后瘤胃内3种主要细菌的变化,本试验选用8头体质量相近的健康夏南牛,在运输前、运输中6h、运输后1、3、7、15d时间段采集瘤胃液。分别以黄化瘤胃球菌、嗜淀粉瘤胃杆菌、脂解厌氧弧杆菌的16SrRNA序列设计引物,运用Real-time PCR技术研究运输应激对肉牛以上3种瘤胃微生物的影响。结果显示,与运输前相比,黄化瘤胃球菌在运输中6h、运后1d浓度显著升高(P〈0.05)。嗜淀粉瘤胃杆菌在运后3d浓度升高到运输前的13.86倍,随后逐渐降低,15d时为运输前8.42倍。脂解厌氧弧杆菌在运输后3d数量出现极显著的降低(P〈0.05),在7、15d逐渐恢复。结果表明,运输应激对黄化瘤胃球菌影响不大;脂解厌氧弧杆菌在运输应激后出现显著的降低,运输后半月内逐渐恢复正常水平。嗜淀粉瘤胃杆菌则呈现明显的上升趋势。采用Real-time PCR方法对瘤胃细菌进行定量可以快速有效的反映出运输应激对菌的数量变化趋势。 相似文献
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为验证苎麻茎叶等副产物制成的青贮饲料作为粗饲料饲喂肉牛的效果,以6头夏南牛为试验动物,以苎麻副产物青贮饲料替代部分精料,在不同育肥期进行体重测量,并采用B超进行背膘厚(FT)、眼肌面积(LA)、肌间脂肪(IMF)活体测量,育肥8个月后屠宰测量净肉率。最终对各组数据进行个体差异显著性分析。结果表明育肥前2个月增重迟缓、第3—6个月持续快速增长,后2个月增重速度降低;背膘厚度(FT)1.024-0.16cm;眼肌面积(LA)133.15±5.06cm2;肌间脂肪(IMF)7.934-0.17%;净肉率46.65±0.71%。说明利用苎麻副产物青贮饲料喂养夏南牛是可行的,苎麻青贮饲料可代替部分精饲料,可减少25%的精饲料用量,降低饲喂成本,可以在苎麻产区推广这种饲养模式。 相似文献
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