基于环境DNA的岩原鲤检测及生物量评估

为建立岩原鲤基于环境DNA （eDNA）的实时荧光定量PCR （qPCR）检测方法,准确鉴别岩原鲤并探讨e DNA浓度与其生物量的定量关系,实验根据岩原鲤mtDNA中12S rRNA基因序列设计eDNA引物和TaqMan探针,利用PCR扩增出岩原鲤12S rRNA基因的序列,克隆入pMD19-T载体,构建重组质粒作为qPCR标准;使用梯度稀释质粒标准品作为模板,进行qPCR扩增,制作标准曲线,建立岩原鲤qPCR检测方法,并评价其特异性、灵敏性和应用效果。结果显示,引物和TaqMan探针对供试的岩原鲤样品出现荧光增长曲线,显示阳性扩增,而其他鱼类和空白对照均未得到扩增信号,表现为阴性;qPCR的阈值循环数（C_t）与标准品拷贝数的线性关系好,且线性范围广,获得的标准曲线相关系数（R²）达到0.999,检测限位DNA浓度为5×10^-6 ng/μL,扩增效率为94.7%;检测养殖不同数量岩原鲤的水体中eDNA浓度,目标DNA浓度和岩原鲤数量存在线性正相关性（R²=0.957）,得到岩原鲤DNA浓度与其个体数...     

基于通径分析和灰色关联分析岩原鲤形态特征与体质量的关系

分析120尾20月龄岩原鲤Procypris rabaudi共11个形态特征的相关性及其与体质量的关系.所有特征对的相关系数都呈显著正相关,从0.394到0.981.通径分析表明,有3个特征体长(X₂)、体高(X₃)、体宽(X₄)能直接极显著影响体质量(Y);有2个特征全长(X₁)和尾柄高(X₁₀)能直接显著影响体质量(Y).最佳的线性回归方程为：Y=-93.112+2.094 X₁+4.063 X₂+7.623 X₃+4.974 X₄+7.260 X₁₀.该研究首次采用灰色关联分析方法探究了岩原鲤形态特征与体质量的关系,其灰色关联系数平均值在0.699～0.897之间,体长(X₂)与体质量(Y)的灰色关联度最高.综合通径分析和灰色关联分析结果,在进行岩原鲤选育时应以体长(X₂)为主要,全长(X₁)、体高...     

长江上游鱼类通用引物的筛选与验证

为了筛选出适合使用eDNA技术对长江上游鱼类多样性进行研究的通用引物,本研究选择了6对引物,分别为：Mifish-U、AcMDB07、Teleo、Teleo2、 Fish16S1和FishCB,对长江上游常见的20种鱼类和3种其他水域鱼类肌肉组织提取的DNA扩增后结果显示,6对引物均能扩增出全部23种鱼类,但引物Mifish-U的扩增效果最好。进一步使用引物Mifish-U对长江上游屏山县、涪陵区和巫山县3个采样点的水样eDNA进行高通量测序,结果显示引物Mifish-U能扩增出研究使用的20种长江上游鱼类,其辨别度较高。使用引物Mifish-U对室内养殖3种鱼类的水样eDNA进行高通量测序后定性定量分析,结果显示黄颡鱼和鲤的生物量与序列数相关性显著,鲫的生物量与序列数相关性不显著。综上,引物Mifish-U更适合作为长江上游鱼类多样性研究的通用引物。     

多鳞白甲鱼早期发育特征观察

为了探究多鳞白甲鱼(Varicorhinus macrolepis)早期发育特征规律,对2019年3月采集于大宁河的多鳞白甲鱼亲鱼进行人工催产和授精,并观察和描述多鳞白甲鱼胚胎和仔鱼发育的形态特征和时序。结果显示：多鳞白甲鱼受精卵为卵圆形沉性卵,具粘性;一般呈金黄色或白色,相对透明;卵径为(2.46±0.12)mm。在水温为(17.2±0.5)℃的条件下,多鳞白甲鱼胚胎耗时147 h 30 min出膜,有效积温达到2 582.56℃·h。整个胚胎发育过程大致可分分为7个阶段：受精卵形成期(0～1 h 48 min)、卵裂期(3 h 38 min～7 h 38 min)、囊胚期(9 h 32 min～22 h 2 min)、原肠胚期(33 h 15 min～45 h 19 min)、神经胚形成期(50 h 24 min～53 h 55 min)、器官形成期(56 h～95 h 55 min)、出膜期(103 h 31 min～147 h 30 min)共7个阶段。初孵仔鱼全长(8.86±0.52)mm,心率114～128次/min。眼色素于2日龄开始出现并逐渐加深;6日龄时卵黄囊耗竭,进...