Bradyrhizobium japonicum工程菌株HN32田间占瘤率的测定

应用特定根瘤菌株接种豆科植物与土著根瘤菌竞争结瘤,在竞争中特定根瘤菌结瘤数占总瘤数的百分数称为占瘤率。这是分析特定根瘤菌株产生增产效果的重要因素。测定占瘤率的方法,主要有抗性标记技术,荧光抗体技术,酶连免疫技术,分子杂交技术和红外线指纹图谱法等,每种方法都有其优缺点。本研究利用HN32菌株的四环素抗性测定技术和α—~(32)P标记的pHN32为探针进行的DNA/DNA杂交技术来考查田间接种大豆根瘤菌工程菌株HN32的占瘤率。     

Bradyrhizobium japonicum工程菌株HN32中外源质粒pHN32增效作用的验证

将Bradyrhizobium japonicum HN32菌株中的外源质粒pHN32,通过三亲本杂交转入大肠杆菌HB101中,继而转入Bradyrizobium japonicum22—10中,得到一系列抗性杂交子HNF1,HNF3及HNF5,检测其中所含质粒,并以22—10,HNF5及HN32进行盆栽试验,pHN32的增效作用得到了证实。     

标记基因在植物病害发生和流行规律研究中的应用

标记基因在植物病害发生和流行规律研究中的应用莫才清（华中农业大学生命科学院武汉４３００７０）导致植物病害发生的生物因素有真菌、细菌等多种微生物。由于微生物个体微小，给植物传染性病害的发生和流行规律研究带来一定的困难。以往研究一直采用病情指数等指标来研...     

用Tn5标记带发光酶基因的华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakuii) 7653 R质粒

在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sac B-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中.将3200个Tn5 标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性.共获得8个菌株,其选择标记消失.质粒检测发现其共生质粒有不同程度的缺失甚至消除.结瘤实验证明,所有共生质粒部分缺失(有的缺失达1/3)的菌株依然结瘤.经用luxAB探针的分子杂交证实,8个菌株中有3个对应的标记菌株其Tn5插在共生质粒上.     

将根瘤菌导入烟草组织细胞内获得成功

Scowcrott和Gibson(1975年)曾报道过豇豆根瘤菌与非豆科植物、烟草的细胞联合培养能显示还原乙炔和富集~(15)N_2的固氮酶活性。Carf-son和Chaleff(1974年)实验证实棕色固氮菌同胡萝卜之间的联合固氮作用。他们在这些实验中仅观察到固氮细菌存在于植物细胞间隙而未能进入到细胞内部。 我们用一种植物生长素作为诱导剂,诱导豇     

应用lutAB基因和gusA基因标记大豆根瘤苗的效果

应用发光酶基因ｌｕｘＡＢ的β－葡萄糖苷酶基因ｇｕｓＡ分别对快生型大豆根苗ＨＮ０１进行了标记研究了这两种标记系统的检测方法和检测效果,并对这两种标记系统在大豆瘤菌中的应用进行了分析比较。     

用Tn5标记带发光酶基因的华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakui)7653R质粒

在ｐＲＫ２０７３的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Ｔｎ５（ｓａｃＢ－ｌｕｘＡＢ）插入华癸根瘤菌７６５３Ｒ菌株基因组中。将３２００个Ｔｎ５标记菌株影印到含有８％蔗糖的ＹＭＡ平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。共获得８个菌株,其选择标记消失。质粒检测发现其共生质粒有不同程度的缺失甚至消除。结瘤实验证明,所有共生质粒部分缺失（有的缺失达１／３）的菌株依然结瘤。经用ｌｕｘＡＢ探针的分子杂交证实,８个菌株中有３个对应的标记菌株其Ｔｎ５插在共生质粒上。