高效液相色谱法测定猪血浆及组织中喹赛多及其脱二氧代谢物

建立了测定猪血浆及肝脏、肾脏、肌肉等组织中的喹赛多及其代谢物脱二氧喹赛多的高效液相色谱(HPLC)法.血浆样用甲醇沉淀蛋白后离心取上清液进样测定.组织样先用乙腈匀浆,用正己烷脱脂后作HPLC检测.色谱柱为ODS C18柱;流动相血浆样测定为乙腈水(2080),组织样测定为甲醇水(4258),流速为1.0 mL/min;紫外检测波长305 nm.药物工作液质量浓度范围为0.005～0.500 mg/L时,血浆样品及组织样品测定条件下药物质量浓度与响应值均具良好线性关系,相关系数＞0.999.血浆中药物质量浓度为0.02、0.10、0.50 mg/L时,喹赛多及脱二氧喹赛多的回收率均大于70%,组织中药物含量为0.05、0.20、1.00μg/g时,肌肉样品的回收率均大于70%,肝脏、肾脏样品则为50%～80%.本试验条件下,喹赛多及其脱二氧代谢物的最低检出质量浓度,血浆样品分别为0.01、0.02mg/L,组织样品2种检测物均为0.025μg/g.测定了工作液3种质量浓度0.01、0.05、0.25 mg/L的仪器精密度,日内相对偏差＜8.0%,日间相对偏差＜17.0%.     

猪尿液中抗菌药物快速筛选拭子法的建立

为防止抗菌药物在动物性食品中的残留,以枯草芽孢杆菌为受试菌,建立一种检测活体动物尿液中抗菌药物残留的快速筛选拭子法,进行宰前活体检疫.添加试验测定猪尿液中5类抗菌药物最低检测限分别为:β-内酰胺类青霉素和氨苄青霉素均为0.05mg/L;氨基糖苷类庆大霉素0.05mg/L、新霉素0.4mg/L;四环素类金霉素0.1mg/L;大环内酯类红霉素0.05mg/L和氟喹诺酮类恩诺沙星0.2mg/L.各抗菌药物添加回收率范围均在64.0%～107.7%,变异系数均小于15%.假阴性结果显示,除青霉素(5%)和氨苄青霉素(4%)出现假阴性外,红霉素、庆大霉素、新霉素、恩诺沙星和金霉素均未出现假阴性.与国外同类试剂盒比较,结果显示两者对10种抗菌药物的检测限一致.     

猪肾脏中氯丙嗪和异丙嗪残留检测方法的建立

建立了猪肾脏中氯丙嗪和异丙嗪残留量检测的高效液相色谱法。猪肾脏中残留的氯丙嗪和异丙嗪,用乙腈提取,再依次用酸化乙腈和正己烷净化,氮气吹干,甲醇溶解后,用Waters高效液相色谱系统,HypersilC18柱,UV检测器,用V(乙腈)∶V(水)∶V(0.5mol·L-1乙酸铵)(50∶49∶1)为流动相,流速1.2mL/min,波长254nm测定,内标法定量。结果表明,氯丙嗪和异丙嗪在猪肾脏中的最低检测限均为10μg/kg,组织中添加量为10μg/kg时,氯丙嗪和异丙嗪的回收率分别为83%和84%,批间变异系数均小于20%。该方法样品处理简单,可同时检测氯丙嗪和异丙嗪在猪肾脏中的残留量。     

利用棉绳采集口腔液监测猪伪狂犬病方法的应用分析

为分析使用棉绳采集口腔液监测猪场伪狂犬病（PR）方法的科学性,本研究拟通过实验室水平、动物试验及临床应用3个方面对使用棉绳采集口腔液监测猪场PR这一方法开展应用分析。首先对采样条件进行优化,并通过模拟试验测定棉绳对伪狂犬病病毒（PRV）的释放能力,通过动物试验测定病毒感染后检出时间,最后对临床样品进行检测分析。结果表明：使用直径为1.0 cm的棉绳,在早上喂料前采集口腔液样品,采样时间为20~30 min,可采集到更能满足试验要求的口腔液。病毒释放能力测定显示,棉绳对PRV的释放能力为50%左右,使用棉绳采集口腔液可检测到1个TCID₅₀/0.1 mL的病毒含量。动物试验检测发现,猪群在感染后28 d中除第5天外,口腔液中病原含量均高于鼻拭子中病原含量,口腔液检测效果优于鼻拭子,且口腔液中病毒的检出时间（感染后第1天）早于血液中抗体转阳时间（感染后第7天）。临床样品检测分析结果表明,PRV疫苗免疫后也可通过口腔液检测到疫苗毒,并且存在无法通过口腔液检测感染PRV野毒后稳定猪中带毒的情况,因此口腔液检测方法应结合gE抗体检测,才可综合判断猪群是否为感染群体。综上,本研究优化了口腔液采集方法,并测定了棉绳对口腔液的释放能力和感染后检出时间,表明口腔液可作为较好的监测猪群PR的手段;口腔液监测方法需结合gE抗体检测来综合判断猪群是否为感染群体。     

喹赛多对断奶仔猪的生长性能和胴体品质的影响

选择35日龄体重相近的二元杂交(长大)断奶去势公猪100头,随机分为5组,每组5个重复(栏),每个重复4头,在相同条件下进行饲养试验和屠宰试验。预饲期7d,试验期40d。试验日粮分别在基础日粮中添加0、50mg/kg喹乙醇、25、50和100mg/kg喹赛多,研究喹赛多对断奶仔猪生长性能和胴体品质的影响。结果表明:在日粮中添加25、50、100mg/kg喹赛多可以提高仔猪的平均日增重,降低料肉比和腹泻率;其中,平均日增重分别比对照组提高5.4%、9.9%和24.3%,料肉比比对照组降低9.3%、13.5%和14.0%,腹泻率分别比对照组降低36.4%、72.7%和74.8%;在仔猪日粮中添加100mg/kg喹赛多可以提高仔猪屠宰率和瘦肉率,提高眼肌面积,降低胴体肥肉率。在断奶仔猪日粮中喹赛多的适宜添加量为50～100mg/kg。     

喹赛多对鸡大肠杆菌病的预防效果研究

报道了药饲喹赛多对鸡人工感染大肠杆菌 (C84 0 10 )病的预防效果。接种前 5d开始用药 ,接种后连续用药 14d ,给药剂量如下 :喹乙醇组药物 2 5× 10 -6,喹赛多试验组药物 (× 10 -6)分别为 12 .5、2 5、5 0、10 0、2 0 0。结果表明 ,阴性对照组发病率达 80 % ,喹乙醇对照组发病率为 2 0 % ,而喹赛多 5 0× 10 -6、10 0× 10 -6、2 0 0× 10 -6组均将发病率控制在 10 %以内 ,明显优于喹乙醇组。且此 3组预防效果显著高于 12 .5× 10 -6、2 5× 10 -6组 ,增重效果极显著高于 12 .5× 10 -6、2 5× 10 -6组 (P <0 .0 1) ,而此 3组间差异不显著 (P >0 .0 5 )。由此可见 ,5 0× 10 -6以上的喹赛多不仅对人工诱发大肠杆菌病有明显预防效果 ,还可促进生长 ,提高饲料利用率。综合考虑 ,推荐 5 0× 10 -6为较理想的临床用药剂量     

喹赛多对猪直肠粪便中大肠杆菌数及肠黏膜免疫影响

去势长大仔猪随机分为6组，Ⅰ和Ⅳ组饲喂不含抗菌药的基础日粮，Ⅱ和Ⅴ组基础日粮中添加100mg／kg喹乙醇，Ⅲ和Ⅵ组基础日粮中添加100mg／kg喹赛多。Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组仔猪灌服10^10CFU大肠杆菌（O139；K86），Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组仅灌服肉汤。喹赛多饲喂猪直肠粪便中大肠杆菌总数和接种血清型大肠杆菌数与喹乙醇饲喂猪均无显著差异（P〉0.05），喹赛多和喹乙醇饲喂猪直肠粪便中接种血清型大肠杆菌数均低于非药物饲喂猪（P〈0．05）。饲料中添加药物可降低空、回肠上皮内淋巴细胞和IgA分泌细胞数（P〈0．05）；喹赛多饲喂猪空肠IgA分泌细胞数低于喹乙醇饲喂猪（P〈0．05）。大肠杆菌接种降低仔猪平均日增重（P〈0．05），药物显著改善平均日增重（P〈0．05）；喹赛多饲喂猪平均日增重在整个试验期高于喹乙醇饲喂猪（P〈0．05）；这些结果显示喹赛多减少肠道大肠杆菌数量，抑制因肠道接种刺激所引起的免疫激活，特别是肠道免疫激活，以促进仔猪生长。     

氨苄青霉素在猪和鸡组织残留的微生物测定法研究

以藤黄八叠球菌为工作菌,用杯碟法测定氨苄青霉素在猪和肉鸡组织中的残留。结果表明,氨苄青霉素在磷酸盐缓冲液,肌肉和脂肪,肝脏和肾脏中的最低检测限分别为０．００１２５μｇ／ｍｌ,０．００６２５μｇ／ｇ,０．０１２５μｇ／ｇ。标准曲线的工作范围为０．００１２５,０．００２５,０．００５,０．为,０．０２μｇ／ｍｌ。     

喹赛多体外抑菌试验

用管碟法测定喹赛多对９种共１５株离常见病原菌的体外抑菌活性。喹赛多对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都有较强的抑菌活性,对鸡大肠杆菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）为０．６２５μｇ／ｍｌ,鸡巴氏杆菌为１．２５μｇ／ｍｌ、金色葡萄球菌为２．５μｇ／ｍｌ,可见对革兰氏阴性菌的抑菌作用略强于革兰氏阳性菌。其抑菌活性比金霉素弱,与喹乙醇相近,比磺胺二甲嘧啶强。结果表明,喹赛多是一种较强的抑菌剂,可作为添加药物用于预防畜