91%高锰链可溶性粉剂田间药效试验

1试验目的 在棉花上喷施不同剂量91%高锰链可溶性粉剂,观察分析该药剂对棉花黄萎病的防治效果. 2试验基本情况     

花生类受体蛋白激酶AhAlSRK的原核表达与体外活性分析

基于对已有转录组数据的分析，发现花生AhAlSRK（LOC107458489）基因在耐铝花生品种99-1507和铝敏 感型花生品种中花2号（ZH 2号）受铝毒害后基因表达量出现明显差异，暗示其可能参与花生铝胁迫下信号传递铝 胁迫响应机制。花生AhAlSRK 基因与拟南芥富含亮氨酸类受体蛋白激酶（leucine-rich repeat receptor-like kinases, LRR-RLKs）VIII_2亚家族中的AT1G56140 基因具有相似的结构，为同源基因。为验证花生AhAlSRK蛋白激酶活 性，克隆了AhAlSRK 的全长编码序列，并基于对AhAlSRK蛋白结构预测的基础上，克隆了AhAlSRK的胞内域，构建 其原核表达载体pGEX-6p-1-AhAlSRK-CD，转入大肠杆菌菌株Rosetta 2 (DE3) plysS。在1 mmol/L IPTG 条件下， 16 ℃低温诱导过夜，成功诱导可溶性GST-AhAlSRK-CD蛋白。重组蛋白GST-AhAlSRK-CD表达效率较高，经过自 磷酸化检测验证其具有丝/苏氨酸和酪氨酸激酶活性。实验结果为后续在蛋白质水平上探究AhAlSRK 基因响应铝 胁迫机理打下基础。     

花生硫氧还蛋白AhTRX h基因的克隆及表达分析

h型硫氧还蛋白（TRX h）是最多的一类硫氧还蛋白,在种子萌发、氧化还原、信号传递以及响应生物和非生物胁迫等多种途径中起重要作用。以花生铝敏感品种‘中花2号’和耐铝品种‘99-1507’为材料,对h型硫氧还蛋白亚族成员AhTRX h进行克隆和表达分析。结果表明：该基因包含长为429 bp的完整开放阅读框,编码142个氨基酸;进化树分析表明,花生TRX h与鹰嘴豆TRX h、拟南芥TH9亲缘关系较近,且含有保守活性位点WCGPC;亚细胞定位显示,AhTRX h定位于叶绿体;构建原核表达重组质粒pGEX-6p-1-AhTRX h,转化大肠杆菌Rosetta菌种,在上清和沉淀均有表达,纯化获得可溶的具活性的重组蛋白,体外检测重组蛋白没有明显的发生亚硝基化的趋势。酵母双杂显示,AhTRX h蛋白没有自激活性,筛选花生文库获得互作蛋白——钙网蛋白和金属硫蛋白。该结果表明AhTRX h可能通过与钙网蛋白和金属硫蛋白相互作用,参与花生对铝胁迫响应。