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试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L-1,16 ℃,220 r·min-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。 相似文献
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枇杷花开放过程挥发性物质变化研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用顶空固相微萃取结合GC–MS 分析技术,对花蕾期、露白期、初放期和盛开期的枇杷
花的挥发性物质进行富集、分离和鉴定,分别鉴定出挥发性化合物84、90、69 和73 种,各占总挥发性
物质的93.84%、97.74%、92.56%和92.67%,都含有酮类、酸类、酯类、醛类、烃类、醇类和其他少量化
合物。从花蕾到盛开过程中,酯类化合物相对含量呈不断上升趋势,而醛类和酸类物质相对含呈快速下
降趋势,烃类和酮类先上升后下降。4–甲氧基苯甲酸甲酯、4–甲氧基苯甲酸乙酯、二–(2–苯乙基)–
草酸酯、苯甲醛、甲氧基苯甲醛、反式二己烯醛、苯乙醇、十三烷、二十一烷等成分是枇杷花香的主要
赋香物质,它们在枇杷花开放不同阶段的相对含量之和分别占总挥发性物质的55.03%、59%、72.68%和
70.71%。枇杷花从露白期到初放期具有较丰富的香气组成,应以此时为较佳的利用时期。 相似文献
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秸秆资源丰富,发展潜力巨大。秸秆还田是实现农业废弃物资源化利用的有效途径,合理的秸秆还田可以有效改善土壤环境,促进农田生态系统碳、氮循环,但不合理的还田也会带来负面效应,造成农田病虫害增加,微生物系统紊乱。因此,该研究总结了国内外秸秆还田现状,分析了应用较为广泛的还田方式之间的差异。并从节水减肥、温室效应、病虫害影响、土壤理化性质以及微生物结构等方面综合评价了秸秆还田的生态效应,进一步揭示秸秆还田技术在农田环境上的调控作用。同时指出当前秸秆还田存在的问题以及从可持续性角度对秸秆还田进行了展望,以期为开展秸秆还田进一步研究提供参考依据。 相似文献
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