降解柴油嗜盐菌的筛选、鉴定及其降解特性

柴油污染对人类健康和生态环境构成了严重威胁,微生物修复成为柴油污染治理常用的方法。以柴油为唯一碳源,筛选获得35株可利用柴油的嗜盐菌,通过测定柴油降解率筛选得到1株高效降解柴油嗜盐菌B-18;通过测定表面张力、排油圈直径,以及进行免疫溶血实验,筛选得到1株高产生物表面活性剂嗜盐菌B-2。B-2排油圈直径可达6 cm,所产生物表面活性剂将发酵液表面张力从74.88 mN·m^-1降至27.15 mN·m^-1,对3%柴油的降解率为44.80%,将该菌鉴定为嗜盐盐渍微菌属(Salimicrobium sp.)。B-18对3%柴油的降解率可达54.00%,鉴定其为盐水球菌属(Salinicoccus sp.),GC-MS方法显示,该菌能降解碳链长度在14~29的烷烃。柴油体积分数为5%时,在Gibbons培养基(GM)中B-2和B-18对柴油的降解率可由原来在无机盐培养基(MSM)中的35.52%和45.62%分别提高至49.08%和53.46%;在GM中混合接菌B-2和B-18对柴油的降解率提高至68.50%,适宜降解条件为100 g·L^-1 NaCl,温度为37 ℃,初始pH为7.5,降解率最高达到70.45%。通过扫描电镜发现,B-2和B-18在降解柴油时发生了形态的典型变化,嗜盐菌表面形成黏性物质,细胞呈不规则团聚,从而加速对柴油的吸收降解。高盐环境下,复合菌系B-2和B-18在柴油污染的生物修复中具有较强的应用潜力。     

一株产蛋白酶的中度嗜盐菌Salinivibriosp.MK070915的选育及产酶条件优化

以1株筛选自盐浓度为21%海盐水的中度嗜盐菌Salinivibrio sp. MK070915为研究对象,该菌株可产胞外蛋白酶。以Gibbons培养基为基底,采用单因素试验和最陡爬坡试验相结合的方法对影响嗜盐菌产蛋白酶能力的重要培养基成分和工艺条件进行筛选,确定主要影响因子及其取值范围;并在此基础上,通过Design-Expert软件对主要影响因子进行四因素三水平响应面试验设计,以蛋白酶活性为响应值优化菌株产酶的培养条件,并验证响应面模型预测值与实测值的一致性。结果表明,最优培养条件如下:以Gibbons培养基为基底,NaCl浓度为5%,pH值为8,培养温度为20℃,碳源为麦芽糖,含量为1.85%,蛋白胨的含量为1.17%,KCl的含量为1.0‰,柠檬酸钠的含量为5‰,经响应面分析得到的蛋白酶活性为44.09 U,与预期值44.22 U相比,差异为0.299%。结果丰富了嗜盐蛋白酶的研究和开发依据,为高盐环境下食品工业催化和农业制剂催化提供了理论基础。