细粒棘球绦虫BAG3和EB1基因的克隆、表达及其在原头蚴细胞凋亡中的作用

旨在探究细粒棘球绦虫BAG3(Eg-BAG3)和EB1(Eg-EB1)的分子特征及在原头蚴细胞凋亡过程中的作用,采用原核表达方法获得重组Eg-BAG3和Eg-EB1,利用生物信息学、蛋白免疫印迹及免疫荧光定位方法对Eg-BAG3和Eg-EB1的分子特征进行了初步探究,随后利用10 mmol·L^-1H₂O₂诱导原头蚴细胞凋亡,qRT-PCR方法检测Eg-BAG3和Eg-EB1的转录水平,并通过RNA干扰技术进一步探究二者与原头蚴细胞凋亡之间的关系。结果显示,Eg-BAG3含有BAG蛋白家族特征性的BAG结构域,Eg-EB1含有内吞蛋白家族特征性的BAR结构域,二者分别属于典型的BAG蛋白和内吞蛋白。免疫荧光定位结果显示Eg-BAG3广泛分布于细粒棘球绦虫的各个发育时期,Eg-EB1主要定位于原头蚴皮层、吸盘及顶突和包囊生发层,而在成虫未见特异性分布。H₂O₂可以成功诱导原头蚴细胞凋亡,且原头蚴中Eg-BAG3和Eg-EB1的相对转录水平都随着H₂O₂处理时间的延长而显著上升,在8 h后的相对转录水平与0 h相比具有显著性差异(P<0.05)。RNA干扰结果显示,Eg-BAG3干扰组原头蚴细胞凋亡率显著高于未干扰组(P<0.05),而Eg-EB1干扰组原头蚴细胞凋亡率低于未干扰组(P<0.05),表明Eg-BAG3在H₂O₂诱导的原头蚴细胞凋亡过程中起到抗凋亡作用,而Eg-EB1起到促凋亡作用。Eg-BAG3可以抑制氧化应激诱导的原头蚴细胞凋亡而Eg-EB1促进细胞凋亡,且二者可能参与调控不育囊的形成。     

多功能膏状防水剂

近年来，随着中、碱性纸需求量的不断增加，造纸企业已基本完成由酸性抄纸向中性抄纸的转变，中性施胶剂已在众多大中型造纸厂得到推广和应用。烯基玻珀酸酐（ASA），作为一种中／碱性施胶剂，在纸厂得到了广泛的应用。目前，常用的ASA乳化剂为阳离子淀粉、阳离子聚丙烯酰胺和表面活性剂中的一种或两种以上的混合物。     

杨树花提取液对分离自灵长类动物大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌试验

目的评价杨树花提取液的中药制剂对分离自灵长类动物体内大肠菌及沙门氏菌的抑菌效果。方法通过牛津杯法测试了其对大肠杆菌以及沙门氏菌的抑菌圈大小,以及用二倍稀释法测定了其最低抑菌浓度(MIC)。结果试验表明,杨树花提取液对大肠杆菌(EMB-LZ-5-14和EMB-LZ-5-3株)表现为高度敏感,对沙门氏菌(SS-LZ-5-7株)表现为中度敏感,而对沙门氏菌(SS-LZ-5-14株)和大肠杆菌(EMB-LZ-4-2株)则表现为低度敏感。其MIC值也应不同菌种而呈现出一定的差异。结论杨树花提取液对分离自灵长类动物体内大肠杆菌以及沙门氏菌具有一定的抑菌效果。     

基于cox1基因对中国青藏高原地区细粒棘球绦虫遗传多态性的研究

通过对中国青藏高原地区细粒棘球绦虫的遗传多态性分析,了解该地区细粒棘球绦虫的遗传变异情况,为细粒棘球蚴病的防治提供基础材料。基于线粒体cox1基因全序列(1 609bp)分析中国青藏高原地区47个细粒棘球绦虫分离株的序列变异情况,并结合NCBI数据库中已公布的中国青藏高原和中东地区所有细粒棘球绦虫cox1基因全长序列,对比分析两个种群的遗传多态性特征。结果显示,47个样品均被确定为G1基因型,分为10个单倍型(C1~C10),其中优势单倍型C1与中东优势单倍型相同,且该单倍型呈世界性分布。中国青藏高原地区细粒棘球绦虫的单倍型多样性(Hd)与核苷酸多样性(π)较低,明显低于中东种群,两个地区Tajima’s D和Fu’s Fs检验值均为负值,遗传结构差异不显著。研究结果表明:中国青藏高原细粒棘球绦虫可能是由一个起源于中东的有效种群进入该地区后,经历了近期群体扩张或遗传瓶颈,在高原地区天然的地理隔离作用下,逐渐发展成了现在的种群。     

细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及诊断价值的初步评价

探究细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的基本特性并初步评价其诊断价值,旨在为细粒棘球绦虫的防控提供依据。本研究原核表达出Eg-cystatin重组蛋白并对其进行生物信息学、免疫印迹分析,用荧光免疫定位的方法检测该蛋白质的分布情况,并以绵羊细粒棘球蚴阳性血清评价Eg-cystatin重组蛋白的诊断价值。结果如下:Eg-cystatin生物信息学分析结果显示,该蛋白质含有一个N端信号肽以及cystatin结构域,是典型的2型半胱氨酸蛋白酶抑制剂,进化树分析显示Eg-cystatin属于绦虫cystatinⅡ型,并且与其他绦虫的cystatin相似性为72.20%~80.66%,免疫荧光定位发现该蛋白质主要分布在原头蚴的表皮和顶突钩,生发层,成虫虫体内部和虫卵。基于Eg-cystatin建立的间接ELISA方法的特异性为79.1%,敏感性为83.3%,与剖检符合率为81.25%。Eg-cystatin在成虫和幼虫时期均有表达,提示该基因与虫体生命活动息息相关,但Eg-cystatin蛋白不适合作为绵羊细粒棘球蚴病的诊断抗原候选。     

发酵羊奶对D-半乳糖致衰老模型小鼠皮肤作用的初步探究

【目的】测定酵母菌发酵羊奶的体外总抗氧化能力以及对衰老小鼠皮肤的影响。【方法】选取健康雌性小鼠40只，随机分成4组，空白对照组，衰老模型组，发酵前对照组，发酵实验组。除空白对照组外，其余各组每日颈背部皮下注射D-半乳糖，连续42 d建立衰老模型。造模过程同时对空白对照组与衰老模型组小鼠背部皮肤涂抹无菌水，发酵前对照组涂抹未发酵山羊奶，发酵实验组涂抹发酵后山羊奶。42 d后测定皮肤组织中的水分含量、丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及羟自由基清除能力。【结果】与空白对照组比较，衰老模型组小鼠皮肤水分含量、羟自由基清除能力、SOD酶活力均显著降低（P<0.05）,MDA含量升高（P<0.05）。与衰老模型组相比，发酵实验组小鼠皮肤中水分含量、羟自由基清除清除率、SOD酶活力显著升高（P<0.05）,MDA含量显著降低（P<0.05）。【结论】发酵羊奶具有一定的延缓皮肤衰老作用。