进境玉米中玉米内州萎蔫病菌PCR检测方法评估

为了准确检测玉米样品中玉米内州萎蔫病菌（Clavibacter michiganensis subsp. nebraskensis,Cmn）,减少测试过程中的假阳性和假阴性结果,利用15对Cmn特异性引物/探针分别测试了Cmn及其他菌株63株,并测试了食用、种用和饲用进境玉米样品300个。测试结果表明,常规PCR和实时荧光PCR方法阳性检出率最高的引物/探针分别是引物PSA-7/PSA-R和探针Cmn-MGB;巢式PCR不适用于样品中Cmn的检测;检测过程中引物Cmn-4F/Cmn-4R和探针rpsJ27P出现假阴性,引物CmnFP/CmnRP出现假阳性。根据测试结果,引物PSA-7/PSA-R和探针Cmn11-P可用于口岸进境玉米样品Cmn检测。     

我国口岸截获的10种乳白蚁的检疫鉴定

乳白蚁（Coptotermes）是一类我国进境植物检疫中经常截获的重要有害生物,然而长久以来其分类和鉴定都比较混乱。本文结合乳白蚁分类研究的最新成果,从我国口岸经常截获的乳白蚁中挑选出10个“确定种”,即台湾乳白蚁（C. formosanus）、曲颚乳白蚁（C. elisae）、格斯特乳白蚁（C. gestroi）、巴布亚乳白蚁（C. pamuae）、甘氏乳白蚁（C. gambrinus）、短刀乳白蚁（C. acinacifomis）、南美乳白蚁（C. testaceus）、中间乳白蚁（C. intermedius）、非洲乳白蚁（C. sjostedti）和阿曼乳白蚁（C. amanii）。对这10种乳白蚁的形态进行了分析,测量了其头部、前胸背板和后颏上9个重要特征值,结合图例分析了头部背面、前胸背板和上颚形态特征。扩增并分析了10种乳白蚁mtDNA上的COI基因片段,进一步验证了乳白蚁种类鉴定结果。最后给出了10种乳白蚁兵蚁的形态鉴定检索表,以期为口岸乳白蚁的检疫鉴定提供参考。     

一种进境抗药性杂草——东方大蒜芥(Sisymbrium orientale L.)

东方大蒜芥(Sisymbrium orientale L.)是十字花科大蒜芥属杂草,与作物争夺资源,影响作物产量,其植株影响作物收割,种子可影响小麦的等级评定;对磺酰脲、咪唑酮和三唑吡啶类除草剂具有抗药性,且具有交叉抗性,大大增加了防治成本。2019年至今,我国多次在进境粮谷中检出该种杂草种子,表明东方大蒜芥可随粮谷贸易长距离传播。应加强粮谷的过筛及筛下物的挑拣,提升检疫鉴定能力,增加相关进口粮谷加工企业周边的环境监测和后续监管工作。     

苹果壳色单隔孢溃疡病菌TaqMan实时荧光PCR检测方法

目的 针对我国检疫性植物病原真菌苹果壳色单隔孢溃疡病菌Botryosphaeria stevensii,建立实时荧光PCR检测方法。方法 根据苹果壳色单隔孢溃疡病菌及其近似种的β微管蛋白基因(β-tubulin基因)保守序列设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,分别以病菌DNA和β-tubulin基因靶标序列重组质粒DNA为阳性标准品检验探针的特异性和灵敏度。结果 探针BsP267对苹果壳色单隔孢溃疡病菌菌株表现出特异性阳性扩增,且与近缘种及其他常见的果腐病菌无交叉反应,扩增效率为105.858%,探针检测DNA的灵敏度达到1 fg/μL。结论 本研究建立的苹果壳色单隔孢溃疡病菌实时荧光PCR检测法具有高特异性和灵敏度,可用于该病害的防控检测和检疫工作。     

进境澳大利亚绿豆中菜豆细菌性萎蔫病菌的检测

利用NA培养基从澳大利亚进境绿豆样品中分离到一株疑似菜豆细菌性萎蔫病菌（Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens,Cff）的细菌分离物2000-1,对该分离物进行革兰染色试验、PCR检测、多位点序列分析和致病性测试。分离物在NA平板上菌落浅黄色,圆形,隆起,黏性,有光泽且边缘整齐,革兰染色阳性。特异引物CffFOR2/CffREV4可扩增出306 bp的预期产物。分离物2000-1的16S rRNA序列与Cff菌株ATCC 51876完全一致,与GenBank中Cff菌株P990的序列相似性为99.58%,序列差异为3 nt。基于6个看家基因（atpD、dnaK、gyrB、ppK、recA和rpoB）的系统发育树显示,分离物2000-1与Cff相关种处于同一分支,与其中巴西大麦Cff分离物3185 UNESP亲缘关系最近,而与菌株ATCC 51876处于不同分支。分离物人工接种可引起大豆叶片水渍状病斑,大豆叶片出现萎蔫和焦枯,病斑周围伴有金黄色晕圈。根据以上测试结果,将分离物2000-1鉴定为菜豆细菌性萎蔫病菌（Curtobact...     

一种有毒杂草——天芥菜

天芥菜（Heliotropium europaeum L.）是一种严重危害牧场的杂草,也是谷物田的主要杂草。天芥菜危害小麦、玉米、大豆等农作物,在一些国家,被列为检疫性杂草。此外,天芥菜中含有5种吡咯里西啶生物碱（pyrrolizidine alkaloids,PAs）,对羊、牛、马、猪和家禽有毒,引起肝损伤。有毒的生物碱可通过受其污染的小麦或鸡蛋等不同方式被人类摄入,进而影响人体健康。天芥菜可混杂在粮谷中进行远距离传播,需高度重视。本文介绍了天芥菜的分布、形态特征、生物学特性、风险评估,以期对检疫、监管、监测和防控有所帮助。