河南烟草病毒病田间发生动态及种类监测分析

烟草病毒病是影响烟草生长的一种重要病害,其发生具有周期性、区域性等特点。为明确河南烟区近年来病毒病田间发生动态和主要病毒种类变化,采用系统调查方法调查豫南、豫中、豫西烟区病毒病田间发生动态,并利用酶联免疫吸附法检测采自豫南、豫中、豫西烟区的病毒病样本。结果显示,烟草病毒病的田间发生动态曲线呈S形,初发期是在烟草移栽后的25～30 d,60～70 d后达到高峰期,烟株成熟后进入稳定期。研究结果还显示,2017—2021年河南烟区主要病毒种类是烟草普通花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）、烟草蚀纹病毒（Tobacco etch virus,TEV）、烟草脉带花叶病毒（Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV）和马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）。     

烟草花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的构建

[目的]防止隐症携带烟草花叶病毒(TMV)的烟苗移栽到大田造成产量损失。[方法]根据TMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因保守序列设计引物及探针，通过绘制标准曲线、重复性、特异性及灵敏性分析，建立了一种TMV的TaqMan-qPCR检测方法。[结果]该方法特异性好，与其他常见的烟草病毒无交叉反应；灵敏度高，检测下限可达到4.53×10¹ copies/μL,比常规RT-PCR检测灵敏度提高了10倍；建立的标准曲线斜率为-3.299,决定系数(R²)为0.993 3,扩增效率为100.97%,且循环阈值(Ct)与质粒标准品浓度之间线性关系良好，重复性试验结果可靠。[结论]利用建立的TaqMan-qPCR检测方法与常规RT-PCR检测方法同时检测烟苗样品，检测结果一致，进一步验证了荧光定量PCR方法的可靠性。