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为提供番茄晚疫病抗病育种候选基因,本研究以高抗晚疫病的CLN2037E自交系和感病5#自交系为实验材料,在前期使用分子标记将CLN2037E中存在的抗晚疫病基因定位在第9号染色体的基础上,利用晚疫病病菌诱导CLN2037E的cDNA文库、番茄基因组CDS数据库、本地Blast程序及实时荧光定量PCR技术,发掘与第9号染色体上EST最佳匹配的CDS以及对晚疫病病菌的响应模式。结果发掘出6条抗晚疫病的候选基因,其中Solyc09g097960、Solyc09g082810和Solyc09g065760在5#自交系和CLN2037E自交系中均响应晚疫病病菌,Solyc09g092030和Solyc09g090430在2个自交系中分别被抑制和不响应晚疫病病菌,Solyc09g008670STBZ的表达在5#自交系中被抑制,而在CLN2037E中被诱导。为验证该基因的功能,成功构建Solyc09g008670基因的过表达和VIGS(Virus Induced Gene Silencing)沉默载体。 相似文献
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第3组胚胎晚期丰富蛋白(LEA3)是一组在胚胎发育后期丰富表达的蛋白,同时它还受水分胁迫和ABA的诱导,与植物抗旱性密切相关。本研究以经过干旱处理的茭白幼苗的mRNA为模板,根据禾本科lea3基因的保守序列设计简并引物进行RT-PCR,得到lea3基因的部分序列,然后结合RACE方法获得全基因两端的序列,经拼接得出茭白lea3基因的全长cDNA,序列分析结果表明该基因的开放阅读框为666bp,编码221个氨基酸,包含2个LEA3基元序列。通过与已报道的LEA3蛋白序列比较,与禾本科中水稻、大麦、小麦、雀麦、玉米的同源性分别为51.2%、41.0%、41.1%、42.0%和40.5%。最终得出结论,茭白lea3基因具有已知物种lea3基因的特征,可以为该基因的功能研究提供参考。目前,该基因已在GenBank中登录,编号为GQ494017。 相似文献
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