猪传染性胸膜肺炎血清抗体检测

应用间接血凝试验对来自甘肃、陕西、宁夏、河南、湖北、湖南和海岛7个省（区）的1470份猪血清进行猪传染性胸膜肺炎血清抗体检测和分型鉴定。结果猪传染性胸膜肺炎平均抗体阳性率为20％。其范围为0－60％；分型鉴定表明，各省（区）的血清型不尽相同，主要为1、3、7型。     

狂犬病病毒糖蛋白基因的克隆及其二级结构和B细胞抗原表位预测

对狂犬病病毒CVS株糖蛋白基因进行克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。然后采用Gam-ier-Robson法和Chou-Fasman法预测糖蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle法、Emini法和Jameson-Wolf法分别预测蛋白质的疏水性、表面可能性和抗原指数,并综合分析预测糖蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,该蛋白结构中含有少量的α螺旋、较多的β折叠以及较为丰富的转角区域,在序列的121~126、133~137、161~165、191~193、201~204、214~216、221~225、264~267区域或其附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。     

猪戊型肝炎病毒分子生物学与流行病学研究进展

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis E,HE)的流行病学特点作一简要概述。     

鸡传染性法氏囊病的诊断和病原分离

1993年3月,酒泉市畜牧兽医站鸡场从地区种鸡场引进迪卡雏鸡2600只。该雏均于出壳24小时内注射马立克氏病疫苗,1周龄用中原某单位生产的鸡法氏囊弱毒苗饮水免疫,10日龄用兰州生物药品厂生产的鸡新城疫Ⅰ系苗滴鼻、点眼免疫。发病前雏鸡发育良好,成活率达96%(2496只)。1月龄时突然发病,次日下午开始死亡,第三日死亡达高峰,每天死亡近百只。本次疫情持续10天,发病率约为85%;死亡460只,死亡率为18.43%,致死率为21.90%。     

猪传染性胸膜肺炎的流行和防制

1999— 2 0 0 0年 ,青海、海南、湖北、湖南的 4个规模化猪场分别发生猪疑似传染性胸膜肺炎 ,经流行病学调查、剖检变化、实验室诊断 ,确诊为由放线杆菌引起的猪传染性胸膜肺炎 ,经过防制疫病得到控制。1　发病情况1 .1　 1 999年春 ,青海省格尔木市某猪场饲养的1 0 0 0多头商品猪发病 ,发病率 40 %,死亡率 1 0 %。1 .2　 1 999年冬 ,海口市某猪场的 3 0 0多头猪发病 ,发病率 5 0 %,死亡率 5 %。1 .3　 2 0 0 0年春 ,湖北鄂州市某猪场 80 0多头猪发病 ,发病率 3 0 %,死亡率 8%。1 .4　 2 0 0 0年夏 ,湖南永州市某外贸猪场 6 0 0 0多头猪发病…     

复方中草药制剂抑菌作用及其对湖羊部分细胞因子mRNA表达的影响

[目的]检测复方中草药制剂对引起湖羊乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌的抑杀作用,并探究该制剂对湖羊外周血中部分细胞因子mRNA相对表达量的影响.[方法]采用牛津杯法和试管二倍稀释法进行复方中草药制剂的体外抑菌试验,荧光定量检测用药前和用药后第1、3、7、14天及21天湖羊外周血中IL-2、IL-6、IL-8、...     

狂犬病病毒核蛋白的原核表达及纯化

采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因,并将目的基因亚克隆入原表达载体pET-28 a(+)中,经PCR、双酶切以及序列分析,结果表明:已成功构建了重组质粒.将重组质粒转化至大肠埃希氏菌Rossetta(DE3),在37℃,1 mmol/L IPTG条件下进行诱导表达.诱导产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为54 KD附近出现较粗的目的带,与预期的目的蛋白分子量相符合.经表达条件优化,用1 mmol/LIPTG在37℃诱导表达5 h,表达量达到最高,Western-Blotting鉴定目的蛋白有较强的免疫原性.为狂犬病毒的N蛋白的新型疫苗的制备奠定了基础.     

OM Ⅲ株口蹄疫病毒P1-2A-3C腺病毒载体的构建

选取O型口蹄疫病毒(FMDV)OMⅢ株的P1-2A和3C作为目的基因,分别扩增出目的片断后,定向亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,得到重组载体pAdTrack-P12A3C,重组穿梭质粒和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后得到重组腺病毒质粒(pAd-P12A3C).将重组腺病毒质粒线性化后转染至HEK293细胞中可观察到典型的绿色荧光,从重组腺病毒的基因组中可扩增到P12A3C基因,证实获得了含有P12A3C的重组腺病毒.     

猪传染性胃肠炎病毒分子生物学研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因组为不分段的单股正链RNA,其编码4种结构蛋白和3种非结构蛋白。TGEV S蛋白是基因工程研究的重点,近年来,S蛋白在大肠埃希菌、沙门菌、腺病毒等中得到了高效表达。将传染性胃肠炎病毒的基因组人工改造成为感染性cDNA的表达载体,此载体可在ORF3处插入外源基因,异源基因绿荧光蛋白可稳定、高效地表达。TGEV基因1和其他冠状病毒相比保守性很强,所以对TGEV聚合酶的研究,特别是其中保守酶的研究,对于抗TGEV及其他冠状病毒药物的研究有着重要的意义。     

狂犬病病毒CVS株G基因和IFN-α基因的克隆及双基因真核表达载体的构建

从狂犬病病毒CVS毒株致死的小鼠脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得G基因;以pMD18-T-α质粒为模板,PCR扩增得到IFN-α基因.两个基因和pIRES真核表达载体分别双酶切,连接构建P IRES-G/IFN-α,经PCR、双酶切鉴定和测序证明载体构建成功.测得的G基因序列长1 575 bp,与CVS株G基因氨基酸同源性为98.5%;IFN-α序列长为570 bp,与GenBank中登录号为NM 001017411的IFN-α基因氨基酸同源性为91.6%.