一例疑似牛破伤风的诊治

正2017年7月,本市一牛场突然发生奶牛陆续死亡,根据发病情况、临床症状和实验室检测,疑似为牛破伤风。现将诊治过程汇报如下。1发病情况和临床症状牛场共饲养330头奶牛,6月20日该场兽医对16月龄左右的牛实施断尾术。从7月3日开始,曾实施断尾术的牛陆续出现急性死亡,共发病9例,死亡6例。患牛临床表现为精神沉郁,脖子僵硬,瞬膜突出(图1),有的体温升高。1周后复诊发现有的病牛     

上海市规模化奶牛场布鲁氏菌病和牛结核病风险评估分级体系研究

为尽快实现上海崇明奶牛布鲁氏菌病和牛结核病(以下简称"两病")区域净化示范区净化目标,通过建立奶牛场"两病"输入性风险评估和内部风险评估模型,结合奶牛场"两病"流行史,构建了上海市规模化奶牛场"两病"风险评估分级体系;应用该体系将奶牛场划分为高、中、低风险场,为实施分类管理策略奠定基础。运用该体系,对上海市崇明区奶牛场每年开展1次"两病"风险评估分级。经过连续3年的风险分级与管理,崇明区奶牛场的"两病"净化效率得到极大提高,并使崇明奶牛"两病"区域净化示范区顺利通过国家验收,表明该体系符合上海市奶牛"两病"净化工作实际。     

猪δ冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),根据PDCoVM基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×10³～1.3×10⁷ copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系,R²=0.994;最低检出限为13 copies/μL,且无非特异性扩增;批内和批间重复性试验变异系数(CV)为0.24%～2.15%,均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测,发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高,二者符合率为95.2%。以上结果表明,本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠,可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。     

猪瘟病毒5种ELISA抗体检测试剂盒的比较

[目的]比较猪瘟病毒（CSFV）5种ELISA抗体检测试剂盒的使用效果。[方法]利用细胞中和试验制备的标准质控血清,制备不同猪瘟抗体效价的阳性血清70份和阴性血清20份,对5种试剂盒的敏感性、特异性和符合率进行比较。利用该5种试剂盒对不同年龄段猪群血清中猪瘟抗体水平进行检测。[结果] 5种试剂盒的敏感性为85.7%-100%,特异性均达到100%,符合率为88.9%-100%。不同年龄段猪血清样品中,5种试剂盒检测结果不尽相同。[结论]猪瘟抗体效价的高低对5种试剂盒检测结果的一致性有一定影响,尤其是针对弱阳性样品时,IDEXX猪瘟抗体试剂盒和荷兰赛迪公司的猪瘟抗体试剂盒检测效果相对较好,为猪瘟免疫检测工作提供了一定依据。     

上海地区马梨形虫病和伊氏锥虫病的血清学调查

为了解上海地区马梨形虫病和伊氏锥虫病的存在情况,我们从上海地区选择9家马场,共采集马血样219份,分别采用商品化ELISA试剂盒和平板凝集试剂盒检测马梨形虫病和马伊氏锥虫病抗体。结果显示,219份血清中,马梨形虫病抗体阳性血清有64份,分布于8家马场,平均阳性率为29.2%;马伊氏锥虫病抗体阳性血清有6份,分布于3家马场,平均阳性率为2.7%。调查数据表明,上海地区马梨形虫病感染率较高,需要加强对该病的防控,同时也要对马伊氏锥虫病进行监测。     

上海市猪群中猪流感病毒优势亚型的血清学调查

为了解当前本市猪群中猪流感病毒的优势亚型,摸清病毒感染现状和规律,对2011年上海市46个场户的723份猪血清应用血凝抑制试验(HI)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了检测。结果显示:本地猪群中猪流感病毒的H1亚型为优势亚型,H3亚型病毒感染率较低,被检场户流感病毒抗体的场阳性率为1.25%～100%,样品阳性率为1.3%～74.7%。提示:猪群对H1、H3亚型流感易感,种猪的感染程度明显高于肉猪,未检测到H5、H9亚型流感病毒抗体。     

上海城区宠物犬犬流感的血清学调查

为了解上海城区宠物犬犬流感的感染情况,作者于2013年4月至2013年9月收集了上海城区20家宠物医院就诊犬共460份血清样本,通过ELISA方法检测对犬流感进行了血清学调查。结果表明:460份血清样品中抗体阳性率为14.57%,母犬犬流感血清抗体阳性率略高于公犬。     

上海市定点监测猪群伪狂犬病病原学调查与病毒分离鉴定

为了解上海市定点监测猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对2014—2015年来自兽医疾病诊断中心、种猪场、屠宰场和规模场的1 863份样品进行PRV荧光定量PCR检测。结果显示,共检出48份PRV核酸阳性,总阳性率为2.6%(48/1 863),其中2014年为4.3%(39/898),2015年为0.9%(9/965),呈现大幅下降趋势,表明上海市通过加强PR免疫,淘汰散养和中小型养殖场,加强种猪场PR净化等措施,使本市猪群的PRV感染得到了有效控制。对部分阳性样品用BHK-21细胞进行PRV分离鉴定,共获得12株病毒,并对其中1株毒株进行了病毒毒价测定,获得了稳定的毒价,这为下一步的动物试验奠定了良好基础。     

一例鸡马立克病继发曲霉菌感染的实验室诊断

鸡马立克病是由鸡马立克病病毒(MDV)引起的一种高度接触性传染病,是鸡最常见的淋巴组织增生性疾病。尽管马立克病疫苗已经应用了40多年,但是本病仍然在世界各地传播,常常造成严重的经济损失。本病主要侵害3~5月龄鸡,死亡率最高可达60%以上。由于本病破坏鸡的法氏囊、胸腺、脾脏等免疫器官,造成严重的免疫抑制,所以感染鸡群对其它病原微生物的敏感性增高,并影响到其它疫苗的免疫效果。最近我们发现1例鸡马立克病继发曲霉菌感染病例,现报告如下:     

液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究

在GenBank中收集猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2基因、猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF2序列、猪伪狂犬病毒(PRV)的gB基因、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的NSP2基因、猪瘟病毒(CSFV)的E2基因和乙型脑炎病毒(JEV)的M基因,利用Primer5.0等分子生物学软件对收集的序列分析比较,筛选出上述基因的特异保守序列并设计引物和探针,将设计好的探针与相应的微球偶联,优化条件,建立检测方法。结果表明:建立的检测PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的多重液相芯片技术具有较好的特异性、敏感性和稳定性,对PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的最低检出量分别为8.50×10~2copies/μL、2.87×10~2copies/μL、2.07×10~2copies/μL、2.61×10~2copies/μL、2.34×10~2copies/μL、2.05×10~2copies/μL,与相应病毒PCR/RT-PCR检测方法相比,敏感性提高了100~1000倍;对临床388份样品同步进行荧光PCR与液相芯片检测,结果99.87%相符。本方法为液相芯片技术在动物多病毒快速高通量检测、鉴别诊断等应用方面奠定了基础。