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太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白(CP)的原核表达及条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)衣壳蛋白(capsid protein,CP)的功能,将PCNNV cp基因连接到p ET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体p EVCP,将其转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果表明:本研究中成功构建了重组载体p EVCP,表达的目的蛋白相对分子质量约为55 000;目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致;对重组菌株p EVCP/BL21的最佳诱导条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、最佳诱导时间3 h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。 相似文献
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以真鳕鱼(Gadus macrocephalus)鱼皮为原料,采用酸、碱、盐和酸碱联合处理4种不同预处理方式,经酶解、过滤、脱色脱腥、冻干等工序制备胶原蛋白肽,比较不同预处理制得胶原蛋白肽的得率和灰分、盐分、金属元素含量以及氨基酸组成。结果表明,不同预处理制得的胶原蛋白肽灰分、盐分含量均为碱处理盐处理酸处理酸碱联合处理,差异均极显著(p0.01);金属元素中主要是钠离子和钙离子,占12种金属元素的95.4%以上。0.1%NaOH预处理制备的胶原蛋白肽得率、氨基酸总量及羟脯氨酸占总氨基酸的比例最高,分别为15.48%,91.87%,10.48%。因此,用碱预处理真鳕鱼皮制备的胶原蛋白肽纯度较高。 相似文献
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由于各种原因,农村成人教育在管理体制、教育目标、教学内容等方面存在令人困惑之处.农村成人教育事关农村社会经济发展,事关农村和谐社会的构建,必须予以高度重视,给予大力扶持. 相似文献
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为了解河南省郑州市中牟市小麦全蚀病菌的变种类型及进化情况,筛选全蚀病菌侵染小麦的分子标记,采用形态学观察、科赫氏法则验证、ITS序列分析和系统进化树构建等方法对分离的小麦全蚀病菌进行鉴定,并对其侵染后小麦病原相关蛋白(pathogen-related protein,PR)基因的表达进行实时定量PCR分析。结果表明,显微形态观察初步确定分离的小麦全蚀病菌为禾顶囊壳Gaeumannomyces graminis(Sacc.)v. Arx.Olivier,经科赫氏法则验证、ITS序列比对及系统进化树分析进一步证明该病菌均为禾顶囊壳。本研究分离的小麦全蚀病菌与地域相距较远的英国、美国的小麦全蚀病菌间的同源性比与来自中国陕西省的小麦全蚀病菌的同源性更高。采用禾顶囊壳4个变种的特异性引物进行PCR扩增,所有分离病菌均扩增出了小麦变种的特异性条带,证实分离菌株为禾顶囊壳小麦变种G. graminis var. tritici。实时定量PCR分析发现,病原相关蛋白基因PR4a、PR4b、PR2、PR10受到小麦全蚀病菌侵染后表达量均显著上调,在侵染后第5~6天达到最高峰,表明这些基因可作为小麦全蚀病菌侵染小麦的标志性基因。 相似文献
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本研究采用形态学观察、核糖体DNA转录间隔区(ITS)克隆、系统发育树和致病力检测等方法对河南周口地区番茄茎腐病菌进行分子鉴定和致病力检测,以期为茎腐病的抗病育种及病害防治提供一定的理论依据。形态学观察结果显示,从周口地区番茄上分离的茎腐病病原菌属于镰孢属,ITS序列分析及系统进化树分析进一步确定其为茄镰孢,分离物与茄镰孢福建分离物(JN232141.1)亲缘关系最近,聚在一个进化支上,致病力检测结果表明在测试的植物中该病菌对茄科植物龙葵的致病力最强,该病菌寄主范围广,可侵染茄科、十字花科多种植物。 相似文献
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<正>无籽西瓜的果实由于没有籽,品质好,食用方便,高产抗病,耐贮运,深受生产者、经营者和消费者欢迎,种植面积逐步扩大,各地都有少数农户在种植。1瓜田准备无籽西瓜虽然对土壤要求不严格,但从高产、优质方面考虑,还是要人为地为其丰产创造一个较好的适宜环境条件。由于无籽西瓜具有怕连作、怕涝、怕旱、根系发达等特点,在选择瓜地时,应选择地势高燥、阳光充足、土层深厚、通透性好、排灌方便的田块,以保证无籽西瓜的正常生 相似文献
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马铃薯是产量高,用途广的经济作物。进入21世纪我国马铃薯在生产技术和栽培水平上有了很大的发展和提高,过去马铃薯作为重要的粮食作物生产,解决了温饱问题,现在随着市场经济的发展,马铃薯迅速发展成为广大农民脱贫致富的重要作物。马铃薯的生产已走向商品化、专用品种、专用途的生产格局正在形成,高产、高效、高质成为生产者追求的目标,以获得最大的经济效益。现将我地区马铃薯栽培技术总结如下: 相似文献