牦牛源产气荚膜梭菌β2基因的原核表达及生物信息学分析

为了原核表达一株牦牛源产气荚膜梭菌Qinghai-1的β2基因及了解其编码蛋白的生物信息。首先利用PCR扩增技术、基因克隆技术构建原核表达质粒并通过高通量测序、双酶切技术、SDS-PAGE检测和Western blotting方法对表达情况进行鉴定,其次利用生物信息学分析的方法对β2毒素蛋白的一级结构、二级结构、蛋白特殊区域、三级结构及B细胞线性抗原表位等多方面进行预测分析。原核表达结果显示：牦牛源产气荚膜梭菌β2基因在温度为37℃,IPTG浓度为1.5 mmoL/L,培养时间为8 h～10 h的条件下可得到大小约为28KD的可溶于细胞质的不含信号肽的目的蛋白。生物信息学分析结果显示：牦牛源产气荚膜梭菌β2基因大小为798 bp,共编码265个氨基酸,与印度的产气荚膜梭(FR687302.1)的β2毒素基因相似性最高;其分子式为C₁₃₉₂H₂₁₃₆N₃₅₆O₄₁₈S₁₁,分子量为30.9 ku,pI=6.04,负电荷(Asp+Glu)残基总数36个,正电荷(Arg+Lys)残基...     

1株牦牛源A型产气荚膜梭菌的生长特性及致病性研究

为了了解青海牦牛源产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)的生长特性及致病性,并计算其对感染小鼠的半数致死量(LD₅₀),以及观察感染小鼠各器官组织的损伤情况,试验复苏牦牛源产气荚膜梭菌ZD-01(CpA ZD-01)并配制种子液,采用振荡比浊法绘制CpA ZD-01菌株的生长曲线,并研究对数期菌液的OD₆₀₀值与稀释倍数和细菌数量的关系;测定其外毒素粗提取液OD₂₈₀值和OD₂₆₀值,计算出不同培养时间毒素蛋白含量;给小鼠腹腔注射菌液,根据小鼠死亡情况确定LD₀和LD₁₀₀,并计算LD₅₀,解剖小鼠观察牦牛源CpA ZD-01菌株对各组织器官的影响。结果表明：按照5%接种量接种菌株后,>2～10 h为对数期;菌液OD₆₀₀值(y)与稀释倍数(x)的关系式为y=-0.607lnx+1.551,R²=0.990,P<0.05;菌液OD₆₀₀     

2021—2022年林芝市藏猪PRRS血清学调查与分析

为了解猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）在西藏林芝市藏猪群中的流行情况,本研究于2021年6月至2022年6月从各区县散养户和养殖场采集没有接种PRRS疫苗的藏猪血清样品共计359份,采用ELISA方法进行PRRSV抗体检测,并统计分析。结果显示,采集的359头份藏猪血清中PRRSV抗体阳性率为10.86%(39/359),其中地区II阳性率最高（14.49%,10/69）,其次是地区I(14.29%,7/49);分性别统计,雌性藏猪与雄性藏猪PRRSV抗体阳性率分别11.98%(26/217)、9.15%(13/142);分种类统计,能繁母猪、种公猪、仔猪、育肥猪PRRSV抗体阳性率分别为12.03%(16/133)、9.76%(4/41)、13.64%(15/110)、5.33%(4/75);分养殖方式统计,养殖场、散养户藏猪PRRSV抗体阳性率分别为11.56%(26/225)、9.70%(13/134)。表明藏猪群中存在PRRSV感染,不同性别、种类、养殖方式的藏猪PRRSV感染差异性不显著（P>0.05）,不同区县、猪场（养殖户）的藏猪PRRSV感染差异性显著（P<0...     

林芝市某藏猪养殖场6种腹泻病原的检测与分析

为了解西藏林芝市某藏猪养殖场猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus, PDCoV)、传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)、A群轮状病毒(Rotavirus A,RVA)、产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)和肠炎沙门氏菌(Salmonella enteriditis,SE)6种腹泻病原的流行情况，于2021年在该养殖场采集藏猪腹泻粪便样本40份，通过PCR方法对6种病原进行检测。结果表明：40份被检样本中PEDV、PDCoV、TGEV、RVA、ETEC、SE的阳性率分别为50.0%(20/40)、12.5%(5/40)、17.5%(7/40)、10.0%(4/40)、52.5%(21/40)和30.0%(12/40);且60.6%样本中检测出两种或两种以上病原体，其中18.2%样本出现了4种病原混合感染的情况。说明该藏猪养殖场存在多种腹泻病原...