荆条种子无菌萌发过程中污染菌的分离鉴定及抑菌剂筛选

荆条具有生态、观赏、药用及实用等方面的价值，但在荆条快速繁殖体系的建立中发现，种子在无菌萌发过程中污染率极高，达50%～75%。为降低荆条种子无菌萌发过程中的污染率，试验通过鉴定其主要污染菌株，筛选出有效抑菌剂，并利用组织分离法对污染菌进行分离和纯化；同时，通过光学显微镜和扫描电镜对污染菌的分生孢子进行细胞学观察，然后采用真菌rDNA基因的ITS序列通用引物进行分子生物学鉴定，最后选择百菌清、代森锰锌、多菌灵、氟吗锰锌4种杀菌剂添加到PDA培养基中进行抑菌效果分析。结果表明，主要污染菌为种子表面附着的真菌，菌落呈绒状黄绿色同心圆形，菌丝为有隔褐色分支状菌，分生孢子为橄榄棕色、有隔、梭型；细胞学和分子生物学鉴定表明，该污染菌为链格孢菌。抑菌研究结果发现，60%氟吗锰锌对链铬孢菌的抑制效果最佳，菌落直径最小。将60%氟吗锰锌稀释1 400倍添加到荆条种子无菌萌发培养基（水琼脂培养基）中，污染率明显下降到5.5%。荆条种子无菌萌发中主要污染菌为链格孢菌，60%氟吗锰锌对其抑制效果最佳。