聚丙烯酰胺凝胶固定化酶法制备麦芽四糖的研究

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAEG)对麦芽四糖淀粉酶粗酶液进行分离纯化,经质谱分析确定了麦芽四糖酶条带,然后切胶回收获得高纯度的麦芽四糖酶。将获得的含有麦芽四糖酶的凝胶制成颗粒通过甲醛链接固定,获得固定化麦芽四糖酶。经薄层色谱和液相色谱分析发现:使用固定化酶生产的麦芽四糖纯度高于粗酶液,尤其是单糖杂质含量显著减少。此外,固定化麦芽四糖酶的比活力升高。     

测定枯草芽孢杆菌生产中温α-淀粉酶方法的研究

通过在60℃,pH值7.0条件下采用3种不同的方法,即QB/T 1803—1993测定法、3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)、Phadebas amylase test法检测中温α-淀粉酶活力,分析用于检测中温α-淀粉酶活力快捷、方便、准确的方法,从而为其广泛的应用及测定提供依据。结果表明,QB/T 1803—1993测定法准确性高、精密度好,且操作简便、测定快捷,适于测定中温α-淀粉酶活力;3,5-二硝基水杨酸比色(DNS法)测得酶活力范围小,适于定性分析;同样的稀释度Phadebas amylase test法在37,60℃下的测定结果基本一致,而又由于中温α-淀粉酶的最适反应温度在60℃左右,说明该法不适于测定中温α-淀粉酶活力。