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设计1对针对猪圆环病毒2型(PCV2)全基因组的特异性引物,从疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后构建重组质粒pMD18-T Simple-PCV2(命名为P-S-PCV2)。用ORF9特异的限制性内切酶Bpu10Ⅰ对P-S-PCV2进行酶切、补平连接反应,构建了ORF9基因缺失突变的重组质粒(命名为P-S-PCV2-J)。用SacⅡ对基因缺失突变的重组质粒进行酶切,获得的线性化基因突变PCV2基因组在体外进行自身环化,形成了相应缺失基因DNA(命名为PCV2-J)。用PCV2-J缺失突变株进行细胞转染、动物致病性和免疫原性、T淋巴细胞亚群的动态变化等部分生物学特性的研究。结果显示:PCV2-J转染IBRS-2细胞后,电镜观察可见病毒颗粒,PCR-RFLP检测有突变株生长;PCV2-J接种仔猪后无临床典型大体病变,PCR-RFLP检测淋巴结中有PCV2-J突变病毒的感染;PCV2-J免疫仔猪后的抗体水平在第2周开始上升,与对照组相比差异显著,CD3+下降,与对照组无差异,CD4+下降,第1周与对照组差异显著,CD8+与对照组差异不显著。结果表明,ORF9基因缺失突变的PCV2仍具有复制感染能力,但免疫原性减弱。 相似文献
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以再生丝素蛋白为原料,采用旋转干燥法,通过控制温度和湿度及乙醇改性,最终得到不溶于水的丝素膜。为了评价再生丝素膜的生物安全性,进行体外细胞毒性、全身过敏反应、迟发型超敏反应、急性毒性反应、热原反应以及溶血性试验。结果:用丝素膜浸提液对体外培养的成纤维细胞进行处理后,细胞平均相对增殖率为92.3%,属于细胞毒性I级。小鼠经由100%丝素膜浸提液多次致敏后再次激发,未产生全身性过敏反应;供试小鼠静脉大剂量注射100%丝素膜浸提液后全部存活,无急性全身毒性反应,7d观察期内小鼠的体质量逐步增长;用100%丝素膜浸提液对家兔进行静脉注射后,兔的单只体温升高幅度为0.2~0.5 ℃,未超0.6 ℃上限,总和也未超1.4 ℃上限;选取不同剂量(100%、50%、25%、10%)丝素膜浸提液对家兔进行溶血试验,溶血率为4.02%、2.57%、1.56%、1.01%,均小于5%。综上所述,本研究制备的再生丝素膜状材料,具有良好的生物安全性。 相似文献
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仔猪副伤寒是由猪霍乱沙门氏菌和猪副伤寒沙门氏菌引起2~4月龄仔猪的一种传染病。临床上以出现肠炎和持续性下痢为其特征,病理变化主要是急性败血症和慢性坏死性肠炎,偶尔表现为卡他性和干酪性肺炎。由于沙门氏菌在自然界分布极广,健康动物带菌又较普遍.因此,几乎所有养猪场的地方,都有不同程度的发生和流行,饲养卫生条件不良的情况下,往往呈地方性流行。 1999年初夏,我院一试验猪场暴发了仔猪副伤寒.由于诊断快速准确.防治措施得力.猪群死亡率在用药后被控制在 1%,而且,很快恢复了正常的采食量,从而保证了原计划试… 相似文献
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