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利用CRISPR/Cas9系统定点编辑葡萄白粉病感病基因VviEDR2(Enhanced disease resistance2),在VviEDR2的DUF1336结构域设计靶位点VviEDR2-T1,构建CRISPR/Cas9敲除载体,通过农杆菌介导法转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织。对PCR阳性植株进行靶位点扩增测序,结果表明,共有8个转基因植株在靶位点处发生不同类型的双等位基因突变,编辑效率为32%;突变体植株生长势较弱,叶片较小,茎秆丛生、细弱。进一步对突变体植株进行抗病检测,结果表明,接种葡萄白粉菌(Erysiphe necator Schw.)5d后,突变体植株叶片上白粉菌孢子仅能萌发出少量较短初级菌丝,表皮细胞产生大量明显的H2O2,而野生型叶片中白粉菌萌发出大量初级菌丝、次级菌丝和吸器,无明显H2O2产生。这些结果表明,可以利用CRISPR/Cas9技术编辑葡萄感病基因VviEDR2,提高葡萄白粉菌抗性。 相似文献
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选择葡萄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase)基因VviPDS1为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除载体,瞬时转化葡萄叶片原生质体,检测到不同类型的突变。通过农杆菌介导转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织,筛选获得卡那霉素抗性植株71株。经PCR鉴定,其中53株为阳性植株,阳性率为74.64%。测序结果表明,共有20株在靶点发生不同类型的突变,编辑效率为37.74%;其中9株产生了双等位基因突变。对其进行氨基酸序列预测,在第202位氨基酸之后发生了不同程度的变异。利用CRISPR/Cas9系统敲除VviPDS1获得的突变体植株呈现整体矮化,其叶片出现不同程度白化。表明CRISPR/Cas9系统可以通过细胞中的瞬时或稳定表达进行基因编辑,可以实现在葡萄编辑植株中产生纯合敲除。 相似文献
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以无核白葡萄一年生枝条为试材,研究ABT和CaCN2对葡萄插条萌芽生根及生理生化代谢的影响。结果表明,ABT处理的葡萄硬枝插条生根早,生根率高,生根数多,不定根生长健壮;CaCN2处理的葡萄插穗萌芽早,萌芽率高,萌芽后枝条平均生长量大;ABT+CaCN2处理的萌芽率和生根率介于二者之间,但均与对照差异显著(P≤0.05),与ABT、CaCN2单独处理差异不显著。ABT和ABT+CaCN2处理能促使插穗中淀粉向可溶性糖的转化,从而促进插穗生根。IAAO、PPO与葡萄扦插生根过程有密切关系,其变化因生根时期不同而不同。总的趋势是前期高活性的IAAO有利于降解体内高浓度的IAA,促进根的诱导;后期低活性的IAAO有利于保护IAA免受分解,促进根的生长。PPO在不定根形成时,活性迅速上升,从而促进生根。 相似文献
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不同基质中IBA与NAA对矮牵牛扦插生根的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以当年现蕾盆栽大花类矮牵牛(Petuniahybrida)为材料,研究了不同基质中IBA与NAA对矮牵牛扦插生根的影响。结果表明,基质中添加激素可提高矮牵牛扦插成活率,促进生根,提高根冠比、叶绿素、根系活力、还原糖和可溶性糖。500mg/LIBA或200mg/LNAA+300mg/LIBA处理可明显促进矮牵牛扦插生根,扦插成活率高,生长良好。泥炭∶沙=1∶3和泥炭∶蛭石∶沙=1∶1∶1两种基质对矮牵牛扦插生根均有作用,但差异不明显。 相似文献
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将红宝石无核、爱莫无核、无核白、大粒红无核和火焰无核的1年生枝条,剪成长20-30cm,带2~3个芽的插条。扦插于盛有基质的营养钵中,置于空气温度22土1℃、相对湿度80%,扦插基质温度20土1℃的环境条件下进行生根试验。在所涉及的6种扦插基质中,各品种均以泥炭:河沙:珍珠岩为1:1:1的基质中芽萌动和生根最早,[第一段] 相似文献
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我国苹果套袋技术应用与研究进展 总被引:16,自引:0,他引:16
套袋是提高苹果外观质量的有效途径。文章介绍了果实套袋的基本技术(果袋类型,套袋时间、方式等)及套袋对果实外观品质、果实内含物、果皮细胞、果皮色素及农药残留量的影响,并对果实套袋存在的问题进行了论述。 相似文献
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