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从苹果寄主上分离得到了苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)中国株系。经基因克隆,测序后发现苹果茎沟病毒中国株系外壳蛋白基因(coat protein,CP)含有714个核苷酸,编码表达由237氨基酸残基组成的27 ku蛋白。通过构建含有ASGV-CP基因的重组表达载体pECASGV-CP,在大肠杆菌BL21 (DE3)中成功表达ASGV-CP蛋白。SDS-PAGE显示其分子质量与预计大小一致。利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体。该抗体可用于Western blot和DAS-ELISA检测技术。基于血清学检测,发现陕西苹果主产区ASGV发生普遍。 相似文献
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从中国苹果寄主上分离苹果茎沟病毒(Apple Stem Grooving Virus,ASGV),克隆并表达外壳蛋白(Coat Protein, CP)基因,并进行生物信息学分析。利用RT-PCR从苹果寄主上克隆了苹果茎沟病毒外壳蛋白基因,序列测定后构建了原核表达载体pET30a(+),转化大肠杆菌(Escherichia coli)进行原核表达。分析比较苹果茎沟病毒外壳蛋白基因核酸序列,分析并预测苹果茎沟病毒外壳蛋白的结构和性质。克隆,表达了苹果茎沟病毒外壳蛋白基因。序列分析显示本研究ASGV CP开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)全长714个核苷酸,与其他分离物CP基因核酸同源率为88.80%~91.90%,与来自日本苹果的P-209进化关系最近。ASGV CP是由237个氨基酸残基组成的27.13 kD蛋白,等电点PI为7.67的疏水性,非跨膜蛋白。二级结构由7个α-螺旋,5个β-片层和无规则卷曲构成。三级结构由于缺少同源蛋白而无法预测。本研究成功诱导表达了ASGV-CP蛋白,分析了ASGV-CP的核酸序列和进化关系,蛋白性质和蛋白结构,为进一步的功能研究和检测应用奠定了基础。 相似文献
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研究旨在建立苹果砧木M26和M9-T337组培快繁体系,为工厂化育苗奠定基础。通过对苹果砧木M26和M9-T337离体培养,筛选出两种砧木较适宜的外植体消毒方法以及初代、增殖和生根培养基。研究结果表明,M26和M9-T337最佳的外植体消毒方法为0.1%HgCl_2处理8 min;M26外植体建立最适宜的激素组合为6-BA1.0 mg·L~(-1)+NAA0.025 mg·L~(-1),M9-T337最适宜的激素组合为6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1);M26最佳的继代培养激素配比为6-BA0.5 mg·L~(-1)+NAA0.05 mg·L~(-1),M9-T337最佳的继代培养激素配比为6-BA 0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1);两个品种最适宜的生根培养基1/2WPM+IAA0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1)。 相似文献
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不同处理对吉塞拉系樱桃砧木扦插效果的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为建立高效樱桃优良砧木‘吉塞拉5号’和‘吉塞拉6号’嫩枝扦插体系,系统研究激素、生长点(不同部位)、插穗时间及叶片数量对‘吉塞拉5号’和‘吉塞拉6号’扦插生根率及扦插幼苗长势的影响。结果表明,利用12~15cm半木质化嫩枝扦插‘吉塞拉5号’和‘吉塞拉6号’时,最佳扦插方案是:5月下旬进行扦插,插穗顶部带4片展叶,采用500mg·L~(-1) IBA浸泡3min,可使‘吉塞拉5号’和‘吉塞拉6号’的生根率分别达到90%和80%以上。对于‘吉塞拉6号’来说,不带生长点半木质化的中段嫩枝扦插生根率更高,扦插苗长势更好。激素、插穗取材部位和时间及叶片数量对吉塞拉甜樱桃的扦插效果有显著影响。 相似文献
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黄瓜嫩果果皮颜色的遗传研究 总被引:2,自引:0,他引:2
黄瓜嫩果果皮颜色是最重要的商品性状之一,在当前育种目标转向多样化和专用化的过程中引起了人们越来越多的关注。本研究以嫩果果皮颜色不同的3份黄瓜(Cucumis sativus L.)品系为亲本,分别配制2个杂交组合Q16(深绿色)×Q8(黄白色)及Q16×Q24(黄白色),构建6个世代遗传群体,通过目测与色差仪相结合的方法对6个世代各单株的黄瓜嫩果果皮颜色性状进行观察和分级处理,并应用植物数量性状主基因+多基因模型进行世代联合分析,研究了黄瓜嫩果果皮颜色的遗传规律。结果表明,Q16×Q8和Q16×Q24两个杂交组合中,嫩果果皮颜色性状的分离群体世代呈现单峰或双峰偏态分布,这表明该性状为数量性状且有主基因控制。遗传分析表明,两杂交组合中黄瓜嫩果果色遗传都符合2对主基因的加性-显性-上位性遗传模型(B-1模型);说明黄瓜嫩果果皮颜色性状由2对主基因控制,在两组合中,其主基因遗传力在F2群体中最高,分别为87.4%和93.1%,另外,两对主基因在两个组合中的加性效应近似相等,分别为1.368、-0.132和1.451、-0.049,两组合中两对主基因的显性效应分别为0.625、1.625和0.529、1.530,两对主基因中第一对主基因加性效应明显,而第二对主基因显性效应明显。两个组合主效基因表现的遗传力较高,表明在杂交育种中对黄瓜嫩果皮色可以进行早代选择。本研究结果为黄瓜嫩果果皮颜色性状的基因定位和新种质创制提供了理论依据。 相似文献
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