羊传染性脓疱病毒NZ2毒株CBP蛋白结构分析与表位预测

本研究应用生物信息学方法,以ORFV NZ2毒株的CBP蛋白氨基酸序列为研究对象,对CBP蛋白的理化特性、亲水性、跨膜区、信号肽、二级结构、三级结构、B细胞表位和T细胞表位进行了预测分析。结果显示,CBP蛋白的相对分子质量为31.179 89 kDa,理论等电点为4.68,半衰期为30 h,稳定系数为43.06,脂肪族指数为81.78,总平均亲水性为-0.383。CBP蛋白为亲水性蛋白,无跨膜区,不属于跨膜蛋白,存在信号肽;二级结构中α螺旋、β折叠、β转角、无规卷曲分别占38.11%、33.91%、5.94%和10.48%,三级结构形似倒立的哑铃,上下对称。筛选出了6个优势B细胞表位、3个CTL细胞表位,无Th细胞表位。CBP蛋白为亲水性膜外蛋白,细胞表位较少,在细胞膜外为ORFV逃避宿主免疫反应发挥作用。本研究为CBP蛋白的功能研究与ORFV的致病机制研究提供了理论依据。     

羊口疮病毒VIR蛋白生物活性鉴定及表位预测

为研究羊口疮病毒(ORFV)VIR蛋白的生物活性,扩增了绿色荧光蛋白基因EGFP和ORFV的VIR基因,构建了真核表达载体pVAX1-EGFP和pVAX1-VIR-EGFP,转染至BHK-21细胞,在荧光显微镜下进行了EGFP和VIR与EGFP融合蛋白的绿色荧光检测,用ORFV的全病毒血清作一抗,进行了Western ...     

猪传染性胃肠炎病毒基因组结构及主要基因功能研究进展

猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）是一种单股正链RNA病毒,为冠状病毒α亚群成员,全基因组7个分区,编码4种结构蛋白和18种非结构蛋白。开展基因组的研究利于完善临床诊断技术、探索病毒作用机制、开发新型疫苗和抗病毒药物,对病毒防控和治疗具有重要作用。文章从TGEV病原学、基因组结构、主要基因及其编码蛋白的功能等方面进行了综述,以期为后续TGEV的分子生物学基础研究提供参考。     

一株副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其遗传进化分析

为确认导致甘肃省平凉市一农场猪群死亡的原因,采集病死猪不同组织样品进行检测,从病死猪的脏器组织中分离到1株革兰阴性杆菌,并对其进行生化鉴定、16S rRNA鉴定及遗传进化分析,同时进行分离菌的致病性试验、耐药性分析、V因子需要试验、"卫星现象"观察。结果表明:分离菌生化特性均符合副猪嗜血杆菌;其16S rRNA基因序列与Genbank中副猪嗜血杆菌株的同源性均高达99%。因此,将该分离菌鉴定为副猪嗜血杆菌,将其命名为PL2016。动物试验及耐药性试验表明,该分离菌具有较强的致病性和多重耐药性。16S rRNA遗传进化分析表明,该分离菌与副猪嗜血杆菌其他菌株具有很高的同源性,其核酸序列相似性高达99%以上。遗传进化分析表明,该分离菌的ompP2、sodA基因与副猪嗜血杆菌其他菌株具有很高的同源性,其核酸序列相似性高达95%以上。     

日粮中添加发酵苹果渣对育肥猪生产性能和血清生化指标的影响

试验研究日粮中添加发酵苹果渣对育肥猪生产性能和血清指标的影响.100头育肥猪随机分成5组,每组20头.对照组育肥猪饲喂基础日粮,试验1、2、3、4组育肥猪饲喂添加5％、8％、10％、15％发酵苹果渣的基础日粮,试验期60 d.结果 显示,试验组育肥猪平均日增重极显著高于对照组(P＜0.01),料重比极显著低于对照组(P...     

羊传染性口疮病的诊断与治疗

羊传染性口疮病具有传播速度快、发病范围广的特点,虽然死亡率较低,但会严重影响羊群的正常采食和生长发育,严重时还很容易和细菌性疾病混合感染,引发死亡,给养殖场带来巨大的经济损失。本文主要以羊传染性口疮病的诊断与治疗为重点进行阐述,提出了综合防治要点,旨在引导养殖者做好该病的防控工作。     

山羊痘病毒ORF112蛋白的原核表达及其免疫原性分析

为表达山羊痘病毒ORF112蛋白并研究其免疫原性,构建了含有ORF112基因的重组表达质粒pET-ORF112;诱导表达和纯化了ORF112蛋白,SDS-PAGE和Western blot对该蛋白进行了分析和生物活性鉴定,并用分析鉴定后的ORF112蛋白免疫接种Balb/c小鼠,采集小鼠血清用间接ELISA进行了抗体检测。结果显示,表达和纯化了含有GST标签的GST-ORF112蛋白,大小约23ku,Western blot显示ORF112蛋白具有较好的特异性,间接ELISA抗体检测表明ORF112蛋白具有良好的免疫原性,为深入研究ORF112蛋白的生物学功能及对山羊痘的诊断与防控奠定了基础。     

羊传染性脓疱病毒OVIFNR蛋白结构分析与B细胞表位预测

本研究应用生物信息学方法,预测分析羊传染性脓疱病毒(ORFV)的OVIFNR蛋白结构与B细胞抗原表位。从羊传染性脓疱病羊嘴唇结痂中扩增出ORFV的OVIFNR基因序列并进行测序鉴定,上传至NCBI;应用生物信息学软件,将扩增所得的OVIFNR基因序列和GenBank公布的参考序列,在核苷酸和氨基酸水平上进行同源性分析和遗传进化树构建,并对OVIFNR蛋白分子的理化特性、跨膜区、信号肽、亲疏水性、二级结构、三级结构和B细胞抗原表位进行预测分析。结果显示:所扩增序列与Hoping和Nantou毒株的OVIFNR基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为99.6%和100%;通过遗传进化树发现,所扩增序列的毒株与Hoping、ShanX、Nantou毒株处于同一分支;OVIFNR蛋白的理论等电点为4.83,半衰期为30 h,脂肪族指数77.92,总平均疏水性为–0.181,无跨膜区和信号肽,不属于跨膜蛋白;二级结构中α螺旋、β折叠、β转角、无规卷曲分别占68.64%、7.56%、15.13%、9.18%,筛选出了8个优势B细胞表位;OVIFNR蛋白为亲水性蛋白,含有较多B细胞表位,具有抗原性,可以作为ORFV检测的新靶点。本研究为OVIFNR蛋白的功能研究和ORFV检测方法的建立提供了理论依据。     

山羊痘病毒P32蛋白的原核表达及其免疫原性研究

为表达山羊痘病毒P32蛋白并研究其免疫原性,构建了含有P32基因的重组表达质粒p ET-P32,诱导表达和纯化了P32蛋白;分别运用SDS-PAGE和Western blot,对该蛋白进行了分析和生物活性鉴定;用分析鉴定后的P32蛋白免疫BALB/c小鼠,然后采集小鼠血清,用间接ELISA进行抗体检测;用小鼠脾淋巴细胞增殖试验,检测该蛋白对机体的细胞免疫活性。结果显示:表达纯化的含有GST标签的P32重组蛋白,大小约39k Da;Western blot显示P32重组蛋白具有较好的特异性;间接ELISA抗体检测和小鼠脾淋巴细胞增殖试验表明P32重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验结果为深入研究P32蛋白的生物学功能以及对山羊痘的诊断与防治奠定了基础。