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【目的】制备抗产单核细胞李斯特菌溶血素O(LLO)的特异性单克隆抗体。【方法】用LLO重折叠的原核表达产物LLO-his免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞,与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选、多克隆及单克隆分离出阳性细胞株后,再用体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定其效价及相对亲和常数;用HBT单克隆抗体亚类鉴定试剂盒鉴定抗体亚型;常规方法制备染色体,观察细胞株染色体数目及标志染色体;Western blot检测抗体的特异性。【结果】获得了2株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为3F5-G3和2B4-C8,其腹水效价分别为1∶(1×105)和1∶(1×107);染色体分别为97±5和93±8条,且观察到标志染色体;相对亲和常数分别为0.49和0.26μg/mL;抗体亚类均为IgG1,轻链均为κ链。特异性鉴定结果表明,2种单克隆抗体均可与LLO蛋白发生特异性反应,而与载体蛋白不发生反应。【结论】获得了抗LLO的特异性单克隆抗体。 相似文献
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从1999年11月至2002年9月农业部动物检疫所质检中心共进行鸡、猪、鸽、鸵鸟、鹅、牛、鹿、水貂、兔等细菌样品检测123例,其中大肠杆菌111例,猪链球菌4例,猪副伤寒沙门氏菌1例,鸡沙门氏菌2例,鸡葡萄球菌1例,牛乳酸杆菌1例、猪魏氏梭菌1例、羊魏氏梭菌1例、兔巴氏杆菌1例。在大肠杆菌病例中,鸡占87例,猪占13例,鸵鸟4例,鹿2例,兔、鸽、鹅、羊各1例、水貂2例、。根据药敏试验可知,当前对鸡大肠杆菌比较敏感的药物有头孢类抗菌素如先锋Ⅴ号、先锋Ⅵ号、菌必治(头孢三嗪、头孢曲松钠)、先锋必(头… 相似文献
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实施动物疫病区域化管理 促进动物及动物产品国际贸易 总被引:1,自引:1,他引:0
动物疫病区域化管理是国际认可的重要动物卫生措施。实施动物疫病区域化管理,提高区域内动物及动物产品卫生水平,是提高动物及动物产品国际竞争力和动物产品安全质量,促进动物及动物产品国际贸易的重要举措。早在20世纪初,世界动物卫生组织(OIE)就已经制定了动物疫病区域化的相关标准,并应成员国要求,开始进行无规定动物疫病国家和区域的国际评估认可,按评估情况将成员国动物卫生状况划分为不同类别,供国际贸易参考应用。经过近二十年的发展证明,动物疫病区域化管理已经成为控制动物疫病、保护动物卫生水平、促进国际贸易的主要动物卫生措施,从而被世界各国广泛应用。 相似文献
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2003年,OIE提出了动物疫病区域化政策的新理念——生物安全隔离区划(Compartmentalisation),即通过采取生物安全管理控制措施等手段,建设基于企业水平的无疫生物安全隔离区。从2004年起,OIE先后在《陆生动物卫生法典》和《OIE公告》中提出了定义、评价和确认生物安全隔离区的原则、要素和步骤建议,为世界各国开展生物安全隔离区建设评估工作提供了方向性指导。虽然生物安全隔离区划的概念提出时间较短,但作为一种全新的动物疫病区域化管理模式,生物安全隔离区划已经引起了世界范围的广泛关注,美国、泰国等畜牧业发达国家均在积极研究探索生物安全隔离区建设评估的模式。 相似文献
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