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根据GenBank发表的PRSV(番木瓜环斑病毒)中国Sm株系的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,以美中红(Caricapapaya L.cv.Meizhonghong)带病样品的RNA为模板进行RT-PCR扩增,将其目的cDNA片段克隆到pGEM-Teasy质粒载体上。以重组质粒作模板,用PCR-DIG标记方法制备cDNA探针,另一种非放射性探针是经凝胶电泳分离、纯化cDNA片段,用碱性磷酸酶直接进行标记。利用地高辛(DIG)标记和碱性磷酸酶直接标记的cDNA探针核酸分子杂交及RT-PCR方法对PRSV进行了检测。结果表明,(1)测序结果表明美中红No.2序列与中国优势株系Sm的同源性为94.7%;(2)DIG标记的3种cDNA探针(861,455和215bp)对样品的总RNA检测结果一致,且861bp的探针杂交斑点最为清晰,上述核酸杂交结果与RT-PCR检测结果相符,核酸分子杂交检测的灵敏度和特异性能满足常规检测的需要;(3)碱性磷酸酶直接标记861bp的cDNA探针可进行PRSV的斑点杂交检测,可获得有效的杂交结果;(4)DIG标记探针对叶脉进行了印迹杂交检测,结果与RT-PCR检测结果相符。 相似文献
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随着我国社会经济的不断发展,城市化进程的不断加快,人们对于生活中业余生活的品质追求也越来越高,风景园林建设在人们的生活中已经越来越重要。风景园林建设不仅能够美化我们的城市和净化空气,同时还能够给我们的日常生活休闲等带来乐趣。因此,现阶段,园林工作的建设者们对于风景园林工程建设必须要有一定的重视。只有对风景园林进行科学合理的设计以及严格的施工控制,因地制宜,为我们的城市居民建设处一个理想的风景园林。本文主要通过对当前风景园林施工作业中存在各种问题进行详细的分析,并且对如何做好风景园林施工进行研究,从而希望为城市的建设提供一点帮助。 相似文献
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本文主要研究我国环境立法质量问题。目前我国环境法律存在诸多问题,特别是环境立法存在“缺陷”,其已经影响到了环境法律法规的实施,环境保护工作的开展。文章首先归纳了环境立法“缺陷”的种种表现,然后在分析原因的基础上,笔者对提高我国环境立法质量提出了一些建议。 相似文献
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山羊腐蹄病在养羊户中发生较多且普遍,危害也较为严重。引起山羊腐蹄病的病原主要是坏死杆菌,占山羊发生跛行病的50%左右。笔者自拟验方治疗该病多例,效果较好,现将治疗方法介绍如下,供参考。 相似文献
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党的"十九大"召开以后,国家加大了对生态文明的建设,风景园林绿化工程作为生态文明建设的重要组成部分变化明显,如PPP项目的兴起、兴建雄安新区生态城市、建设国家公园体系等,彰显了国家对风景园林绿化事业的发展越来越重视,防护林建设、庭院绿化、家庭园艺等的兴起也拓展了风景园林绿化的业务领域,给各行各业都带来了机遇和挑战。风景园林绿化工程因投入比重大,其利润对施工单位来讲,也是可观的。但目前风景园林绿化工程结算时争议问题较多,尤其以苗木结算数量以哪个为准争议较大。 相似文献
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墨兰组织培养结合化学处理脱除建兰花叶病毒(CymMv) 的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对墨兰原球茎顶端分生组织培养结合化学处理脱除建兰花叶病毒(CymMv) 病原的效果进行了研究。取1~2 mm大小的墨兰原球茎顶端分生组织, 经0, 20和40 mg·L - 1的三氮唑核苷浸泡15 min处理和继代培养, 诱导再生植株。RT2PCR检测表明: 从带病叶样提取的RNA经反向转录和PCR扩增反应, 在琼脂糖凝胶电泳中检测到长为767 bp的CymMv病原特异扩增产物, 而健康墨兰叶样中未检测到该扩增产物。单纯利用原球茎顶端分生组织培养获得的试管苗, 脱毒率为72.9%; 原球茎顶端分生组织经过20 mg·L - 1的三氮唑核苷处理, 可以获得100%的无病毒苗。虽然三氮唑核苷处理造成原球茎顶端分生组织细胞一定程度的伤害, 但经过5~6个月的培养, 分生组织能恢复生长, 不定芽能有效地增殖, 并获得了再生植株。当三氮唑核苷处理浓度为40 mg·L - 1时, 原球茎的顶端分生组织出现透明和褐变现象, 细胞活力难以恢复。 相似文献
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