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【目的】从猪肠道中分离出无毒力基因且无抗生素耐药性的大肠杆菌,并分析其生长性能和遗传进
化规律,以期为开发猪用微生态制剂或口服疫苗奠定基础。【方法】采集广东省 2 个地区养猪场的 11 头和 15 头健
康成年猪的粪便样本。首先,采用培养方法从麦康凯培养基中分离出疑似大肠杆菌的菌株,通过 16S rRNA 序列分
析鉴定其是否为大肠杆菌菌株;然后,采用 PCR 方法验证所选大肠杆菌是否含有 13 种常见的猪致病性大肠杆菌毒
力基因,并以 7 类（14 种）抗生素进行药敏试验;最后,对筛选出的优质大肠杆菌菌株进行生长动力学分析,并
提取其全基因组 DNA,构建全基因组系统进化树。【结果】在 260 株疑似为大肠杆菌菌株中,经 16S rRNA 序列分
析确认后有 206 株属于大肠杆菌。其中,107 株大肠杆菌不含 13 种常见毒力基因,25 株大肠杆菌对 7 类（14 种）
抗生素敏感。在这 25 株菌株中,有 23 株非致病性且无抗生素耐药性大肠杆菌（编号为 2-9、3-2、3-4、5-1、6-1、
6-2、6-9、6-10、8-2、8-9、10-5、B-4、B-6、B-7、B-10、D-10、E-2、E-10、J-1、J-4、K-6、L-6 和 O-9）
的生长性能与大肠杆菌 Nissle1917、MG1655 相似,其他 2 株大肠杆菌（编号为 6-4 和 5-2）的生长速度高于 Nissle
1917 和 MG1655。此外,有 10 株菌株（编号为 E-10、E-2、6-4、6-9、8-2、O-9、3-2、6-2、J-1、K-6）耐酸性
能较好,可能适合长期定殖于猪胃肠道内。基于 SNP 核心基因组系统进化树分析,发现这 25 株菌株中有 9 株菌株（编
号为 3-2、6-10、10-5、6-1、8-9、5-2、L-6、O-9、K-6）在系统进化树开端处属于同一大类群,表明它们极可
能为猪原生大肠杆菌的祖先群。【结论】综合上述大肠杆菌的抗生素敏感性、生长性能和全基因组进化树和胃液环
境耐受性能分析,菌株 O-9 在这 4 个方面均具备优势,该菌株与大肠杆菌 Nissle 1917、MG1655 的生长动力学相似
甚至更优,意味着 O-9 菌株可能是优质的猪肠道原生大肠杆菌,具有极大研究潜力。 相似文献
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香菇多糖提取工艺优化及其抗氧化与抑菌功效研究 总被引：1，自引：1，他引：1
为提高香菇多糖提取效率、研究其抗氧化性和抑菌效果,采用超声波辅助热水浸提法,设计L9(33)正交试验在料液比、浸提温度和超声时间三个因素优化香菇多糖提取工艺,检测其提取率,抗氧化性和抑菌效果。结果表明：提取多糖效率最佳工艺为料液比1：40(g：mL),浸提温度90℃,超声时间40min,最高提取率达到6.47%。抑菌功效最佳工艺为料液比1：40(g：mL),浸提温度80℃,超声时间20min,大肠杆菌最大抑菌圈直径为9.95±0.86mm,枯草芽孢杆菌最大抑菌圈直径为8.73±0.57mm。清除羟基最佳工艺料液比1：30(g：mL),浸提温度90℃,超声时间30min,清除率为22.04%。还原力最佳工艺料液比1：30(g：mL),浸提温度90℃,超声时间40min,其还原力最大。在提取和抗氧化试验中的三个因素影响程度相同即料液比＞浸提温度＞超声时间。提取条件进行优化后,提高了提取效率,试验结果还表明,香菇多糖有一定的抑菌和抗氧化性功效。 相似文献
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