关键工序对造纸法再造烟叶主要化学成分的影响

为研究生产过程中关键工序对造纸法再造烟叶主要化学成分(常规成分和主要细胞壁物质)的影响,采用连续流动分析法和洗涤剂法分析在制品固形物中主要化学成分的变化规律。结果表明:烟梗的钾、氯和纤维素含量高于烟末,总碱和半纤维素含量低于烟末,针叶木、阔叶木的主要成分为纤维素和半纤维素。洗梗会降低烟梗中61%～77%的常规成分,且钾、氯的溶出量高于水溶性总糖和总植物碱,提取段可溶物主要在1、2级提取过程中溶出。在制浆抄造工序,浆料中常规成分溶出较少,制浆会降低半纤维素含量,抄造过程中约19%浆料流失。涂布能提高样品中常规成分含量,降低细胞壁物质含量,是调控产品感官质量的主要工序,涂布后工序对在制品的主要化学成分影响较小。控制关键工序的主要化学成分对调控产品质量具有重要意义。     

肝脏特异性表达载体的构建及Western blotting检测

研究靶向于肝细胞的组织特异性siRNA,实现siRNA基因治疗的组织特异性,可用于特异性治疗乙肝,突破RNA干扰技术在临床应用的一大障碍。用靶向于EGFP的siRNA（以下简称siEGFP）替代靶向于乙肝病毒保守区的siRNA,构建可以在肝细胞中特异性表达的载体,用来表达siRNA。将目标载体分别转染肝癌细胞HepG2、乳腺癌细胞MDB-MB-231、人胚肾细胞293,在蛋白质水平上检验siRNA抑制的组织特异性。Western blotting结果证实,siEGFP在肝组织来源的细胞系HepG2中抑制效率明显高于其他两组细胞。构建的载体可以在肝癌细胞系中特异性的表达siRNA,而在其他组织细胞中不表达,实现了组织特异性。进一步将siEGFP替换为抑制HBV表达的siRNA,同样可以实现肝脏特异性的表达。     

顶空固相微萃取-气相色谱/飞行时间质谱法分析再造烟叶提取液中的中性挥发性成分

[目的]分析再造烟叶提取液中的中性挥发性成分.[方法]通过考察SPME萃取头类型、样品体积、萃取时间等因素,建立顶空固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱/飞行时间质谱(GC/TOFMS)联用的方法,对再造烟叶提取液中的中性挥发性成分进行测定.[结果]确定了HS-SPME的最优参数为PDMS/DVB固相微萃取头、样品用量2 mL、萃取温度75℃、萃取时间40 min、解吸时间3 min.该方法相关线性关系良好、重现性较好,平均加标回收率在80％～120％.[结论]该方法操作方便、简单,可满足再造烟叶提取液中中性挥发性成分的测定要求.