人工饲料蛋白质含量与蚕对氨基酸的吸收

蛋白质营养是蚕成长和泌丝的物质基础.明确饲料在不同蛋白质含量条件下,蚕对氨基酸的吸收和利用情况,对于改进人工饲料配方,提高饲料效率和经济效益,具有重要意义.本试验用五种不同含量的脱脂大豆粉配制的人工饲料,饲养5龄雌蚕.结果表明:随着饲料蛋白质含量从9.12%增至37.18%,每头蚕的氨基酸排出量,从54.92毫克减至37.18毫克.但蚕体对亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Pne)、缬氨酸(Val)、苏氨酸(Thr)、组氨酸(His)、谷氨酸(Glu)等的吸     

半合成饲料的蛋白质含量对家蚕四龄幼虫的影响

用８种脱脂大豆粉和纤维素粉含量不同的半合成饲料饲养４龄蚕，结果表明取食蚕蛋白含量为７．７９＾和１１．６９％饲料的幼虫分别仅存活５．７天和６．８天，取食蛋白质含量大于１５．５９％的有正常蜕皮，随着饲料蛋白 含量从１５．５９％增至３８．９７％。４龄历期从８．７天缩短至６．７天，平均干物食下量和消化量分别从每蚕４８５ｍｇ和１４９ｍｇ降至２２４ｍｇ和１２７ｍｇ，近似消化率则从３２．０４％增至５２．０５％。     

意大利蜜蜂蜂毒透明质酸酶基因的克隆与序列分析

从意蜂毒腺抽提总RNA,用RT-PCR获得蜂毒透明质酸酶(AmHya)基因,其核苷酸序列全长为1 149 bp.将AmHya氨基酸序列与中蜂蜂毒透明质酸酶(AcHya)和其它5种透明质酸酶(Hya)氨基酸序列比较,结果显示,AmHya与 AcHya的同源性最高(91%),同时对7种Hya作了分子结构与分子进化分析.     

茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)实时荧光定量PCR检测方法的优化及应用

选用茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)基因组中序列特异性很高的p16基因为目标基因,通过设计引物、PCR扩增、目的片段与载体连接转化获得含p16基因的重组质粒进行测序,进而以经测序鉴定的p16基因的PCR纯化产物作为实时荧光定量PCR标准品模板,稀释后建立SYBR Green I荧光定量标准曲线,统计分析显示标准品浓度的对数值与Ct值之间存在良好的线性关系(R2=0.9981)。该方法的检测灵敏度为102,扩增产物形成单一的特异性熔解峰,组内组间变异系数均小于3%。同时分别对含有其他茶树害虫病毒和不同浓度的茶尺蠖病毒产品的样品进行检测,能明确样品中是否含有EoNPV及含量。根据已建立的方法对感染病毒后不同时间段的茶尺蠖幼虫进行检测,每克幼虫样本内p16基因拷贝数的增殖倍数对数值与感染时间呈正相关(R2=0.9935),可以获得茶尺蠖幼虫感染病毒后不同时间的增殖动态。上述结果表明,该方法能定性定量鉴定茶尺蠖核型多角体病毒,可用于茶尺蠖核型多角体病毒类生物农药的检测和感染过程检测。     

二种胡蜂前溶血肽原基因在昆虫杆状病毒系统中的表达

构建亚非马蜂和额斑黄胡蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT-PhPPM和pBacHT-VmPPM,转化到穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中,得重组穿梭载体Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-5B1-4,最后观察细胞表达时相动态.经ELISA法证实,胞内表达产物具有良好的抗原性,证明二种重组病毒Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM已在昆虫细胞中得到了表达.     

植物内生菌在害虫治理中的应用

对植物内生菌在害虫治理中的应用及其控制害虫的机理等方面的研究概况进行综述，并讨论了植物内生菌直接利用存在的主要问题和在害虫综合治理中的应用前景。     

意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2基因在大肠杆菌中的表达

将意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2(AmPLA2)成熟肽编码区基因(405 bp) 插入表达载体pETBlue-1,在大肠杆菌Tuner(DE3)placⅠ中诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,表达产物分子量为15 kD,约占细菌总蛋白的4.3%;用兔抗AmPLA2多克隆血清为第一抗体作Western blot检测,表达产物显示与天然AmPLA2同样的特异性印迹,证实AmPLA2 基因已在大肠杆菌中得到表达.     

黑守瓜中一种新negevirus的鉴定和分析

negevirus(nege-like virus)是病毒学领域新增的一个分类单元,主要包括在节肢动物中鉴定的一类昆虫特异性病毒。本研究利用宏转录组技术从黑守瓜（Aulacophora lewisii）中鉴定到一种新的negevirus,命名为Nbu Aulacophora lewisii nege-like virus 1(NbuALNV-1)。NbuALNV-1为正义单链RNA病毒,全基因组包含9 832个核苷酸（nucleotide, nt）（不包括多聚腺苷酸尾）,5′、3′非翻译区长度分别为292、77 nt。NbuALNV-1基因组包含6个开放阅读框,预测具有5个典型的negeviruses保守结构域,包括病毒甲基转移酶结构域、RNA病毒解旋酶结构域、RNA依赖的RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase, RdRp）结构域、DISB-ORF2＿chro结构域和SP24结构域。本研究利用NbuALNV-1和已报道的negeviruses的RdRp氨基酸序列基于最大似然法构建的系统发育分析表明,NbuALNV-1与Hubei Wuhan insect...     

家蚕1—3龄一回给饵无菌育密度和空间对蚕生长发育的影响

本文报道１－３龄一回平板给饵法的饲育密度和空间对幼蚕生长发育的影响。结果表明，随着密度从每３４０ｃｍ＾２饲育１０头增至２１０头，蚕体的生长发育速率减慢，平均体得和眠蚕体重均显著下降。平板状饲料上方的空间高度在１．０－６．０ｃｍ范围内，３龄眠蚕体重在２．０ｃｍ处理为最重，但对蚕体生长发育速率和平均体重影响则不显著。１－３龄一回育的饲育密度建议以每头蚕体占面积２．１－２．７ｃｍ＾２为宜。     

中华蜜蜂王浆多肽Apisimin基因转录、克隆与表达研究

构建中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂头部cDNA文库并进行了测序,从8568个表达序列标签(expression sequencetag,EST)中获得96个Apisimin基因克隆,结果表明Apisimin基因是一个高丰度转录的基因。进一步对克隆分析表明该基因cDNA全长为379 nt,包含一个237 nt、可以编码78个氨基酸的ORF。推导的Apisimin蛋白N端含有一个由24个氨基酸残基组成的信号肽,后端为54残基、预计分子量为5.9kDa的成熟肽。该ORF与意大利蜜蜂和印度蜜蜂的Apisimin基因核苷酸同源性分别为100%和95%。将成熟肽编码区进行亚克隆,构建了Apisimin与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEX/apisimin,并将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达。SDS-PAGE和薄层扫描表明,表达的融合蛋白分子量为31 kDa,表达量占细菌总蛋白的22.1%,约50%是可溶性的。通过亲和柱进一步纯化了表达的融合蛋白。