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运用指数富集配基系统技术(SELEX)筛选人超氧化物歧化酶(rhSOD)特异性核酸适体。体外化学合成长度为78 bp的中间含有35个随机序列的单链DNA文库,通过比较不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库,采用硝酸纤维素膜为介质,以SOD蛋白为靶标,筛选其亲和性核酸适体,酶联仪测定定D450值,计算每轮ssDNA文库与靶分子的结合率。经过11轮筛选后,随机ssDNA文库与SOD的结合率从初始的0.47%上升到37.5%,随着筛选轮数的增加,ssDNA与靶分子结合率趋于稳定。初步筛选出具有高亲和力的SOD酶特异性核酸适体,为进一步开发和研究SOD新药及模拟药物提供参考。 相似文献
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通过反向Northern筛查小麦旱选10号幼苗水分胁迫诱导表达的cDNA文库,选择一个在水分胁迫1、6和12 h均上调表达的cDNA克隆作为“种子”序列,利用电子延伸和RT-PCR方法,获得一个开放阅读框为1 434 bp,编码477个氨基酸的cDNA序列。由该序列推测编码的蛋白含有1个典型的ABC1保守域(123~243氨基酸)和1个AARF域(42~369氨基酸),但是没有发现ABC1向线粒体转移的信号肽前体序列(PD017350),因此,将该基因命名为TaABC1L。同源比对结果表明,TaABC1L只与水稻、拟南芥中4个尚未研究功能的基因编码的氨基酸序列高度同源。实时定量RT-PCR结果显示,TaABC1L对渗透、高盐、低温等逆境胁迫和ABA处理均表现出应答反应,但是在不同胁迫条件下表达高峰出现的时间和表达强度上存在差异。其中受NaCl胁迫1 h,基因的表达量已达到对照的30倍,之后其表达量迅速回落,但仍高于对照;受ABA诱导时,其表达量略有增加,在12 h的最高表达量也仅为对照的2倍。 相似文献
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利用抑制差减杂交技术,分别构建小麦幼苗在水分胁迫1 h、6 h、12 h、24 h和48 h条件下的cDNA文库,得到6 733条EST序列。通过对这些序列的组装、比对、注释和分类,初步构建了小麦不同水分胁迫条件下的应答基因表达谱,发现水分胁迫应答基因表达的时间特性及4种表达模式。在648个已知功能注释的uni-gene中,6.17%属转录因子类基因,2.16%为蛋白磷酸酶类基因,4.01%是蛋白激酶类基因,19.90%为避免损伤和修复蛋白类基因,2.0%为大分子保护因子类基因,9.11%为膜蛋白类基因,这些基因可能是抗旱相关的重要基因。 相似文献
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小麦TaABC1L的克隆及表达特性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
通过反向Northern筛查小麦旱选10号幼苗水分胁迫诱导表达的cDNA文库,选择一个在水分胁迫1、6和12 h均上调表达的cDNA克隆作为“种子”序列,利用电子延伸和RT-PCR方法,获得一个开放阅读框为1 434 bp,编码477个氨基酸的cDNA序列。由该序列推测编码的蛋白含有1个典型的ABC1保守域(123~243氨基酸)和1个AARF域(42~369氨基酸),但是没有发现ABC1向线粒体转移的信号肽前体序列(PD017350),因此,将该基因命名为TaABC1L。同源比对结果表明,TaABC1L只与水稻、拟南芥中4个尚未研究功能的基因编码的氨基酸序列高度同源。实时定量RT-PCR结果显示,TaABC1L对渗透、高盐、低温等逆境胁迫和ABA处理均表现出应答反应,但是在不同胁迫条件下表达高峰出现的时间和表达强度上存在差异。其中受NaCl胁迫1 h,基因的表达量已达到对照的30倍,之后其表达量迅速回落,但仍高于对照;受ABA诱导时,其表达量略有增加,在12 h的最高表达量也仅为对照的2倍。 相似文献
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金莲花的生药鉴别与药用 总被引:6,自引:0,他引:6
金莲花系毛茛科金莲花(Trollius chinensis Bunge.)的干燥花,又名旱金莲,是佛教汉化过程中清代始见应用的一种草药.民间用于急、慢性扁桃体炎、中耳炎、上呼吸道和肠道感染.赵学敏在<本草纲目拾遗>中引用<五台山志>云:"山有旱金莲,如真金,挺生陆地,相传是文殊圣迹."所谓旱莲花是相对于水生的佛教圣花"莲"而言,五台山又称清凉世界,山高水少,自然无莲为奉,满山遍野的金莲花成了替代品.经过寺僧"尝百草"的实践,发现其效用,并作保健茶饮用,又为酬客之土特产礼品. 相似文献
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[目的]探索黄瑞香组织培养和快速繁殖的培养条件。[方法]以黄瑞香幼嫩茎尖为外植体,采用植物组织培养和生物统计的方法研究黄瑞香的组织培养和快速繁殖技术。[结果]确定黄瑞香茎尖诱导愈伤组织的最佳培养培养基为WPM+IBA 0.1 mg/L+KT 0.1mg/L,茎尖诱导芽的适宜培养基为WPM+IBA 0.2 mg/L+6-BA 3 mg/L,幼芽形成根的适宜培养基为1/2 MS+IBA 3.0 mg/L。[结论]该研究结果为黄瑞香的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础,该研究为黄瑞香组织培养和快速繁殖提供依据。 相似文献